文 献 综 述

1.碱性蛋白酶与海洋产碱性蛋白酶细菌介绍

碱性蛋白酶，指在碱性条件下具有活性，能够水解蛋白质肽键的酶类，最适pH在9～11范围内。其广泛应用于洗涤剂、食品、医疗、酿造、丝绸、制革等行业；然而，许多碱性蛋白酶在工业化应用中存在局限性，比如在含阴离子表面活性剂和氧化剂的环境中活力和稳定性均较低；碱性蛋白酶的主要来源为微生物提取，研究和应用较多的主要是芽孢杆菌，以枯草杆菌为最，也有少量其他菌种，比如链霉菌。

近年来，碱性蛋白酶由于与传统的化学催化剂相比具有催化能力强、底物专一性高等优点，已被广泛应用于制革、银回收、医药、食品、饲料、化学工业、废物处理等生产及行业，尤其是作为无磷洗衣粉的添加剂使用，使碱性蛋白酶商业制剂的销售占整个蛋白酶市场的1/3 以上^[1]。

天然菌种的生产能力和所含的酶活性、稳定性往往达不到工业生产的需求，需要对菌种进行筛选改进，常用的方法有诱变、基因工程、蛋白质工程、孢子热处理等。主要目标是提高酶的活性、稳定性（耐温耐碱）、抗氧化、抗螯合性能等以便其更好地投入使用。

海洋微生物与陆生微生物相比其生存环境更加恶劣，如高渗、低温、高压、低营养等，也造就其独特的代谢途径，因此海洋微生物所产蛋白酶可能具有更加独特的酶学性质和构造，其中，不乏我们所需要的碱性蛋白酶。另一方面，海洋微生物独特的生存环境也为我们提供了更多的筛选方案。

2.研究背景与研究意义

碱性蛋白酶作为新兴生物技术产业的产物，发展迅速，发展前景巨大。

几乎所有的生物体均有蛋白酶的存在，但是只有高产率的胞外蛋白酶生产菌株才具有工业应用价值。微生物生产蛋白酶技术的开发还存在产物活性不高、性质差异大、基因工程菌不稳定等问题的制约，因此筛选高产碱性蛋白酶生产菌株仍是解决诸多问题的重要手段。由于芽胞杆菌的高热和酸碱稳定性，多数商业蛋白酶的生产菌株采用芽胞杆菌来源，故芽胞杆菌来源蛋白酶的筛选显得尤为重要^[1]。

目前碱性蛋白酶的研究主要集中在产酶菌株筛选、酶学性质和产酶基因克隆等方面。不过，目前通过基因工程获得的碱性蛋白酶活力一般都不高。诱变育种是菌种选育研究中最常采用的技术手段，它不仅可以提高菌株的生产能力，而且还可以改进产品的质量、扩大品种、简化工艺。同时，还具有速度快、收效显著和方法简便等优点，因此，在科学实验和生产上都得到了广泛的应用，目前仍然是最主要、最广泛使用的一种育种手段^[2]。