提取分离组氨酸标签蛋白的新型磁性微珠研制任务书
2020-02-18 17:21:44
1. 毕业设计(论文)主要内容:
金属螯合亲和层析在蛋白质纯化领域一直有非常广泛应用,最广泛的是在重组蛋白/多肽的C端或N端引入六聚组氨酸(也称为组氨酸标签),利用金属螯合亲和层析分离得到高纯度的重组蛋白质/多肽。金属螯合亲和层析是根据蛋白质表面的氨基酸残基(如组氨酸、色氨酸、半胱氨酸等)与金属离子亲和力的不同而实现分离纯化,具有更稳定、更经济,且吸附效率更高等优点。金属螯合磁珠因为其超顺磁性可在磁场作用下特异分离带组氨酸标签的蛋白质或多肽,操作简便、快捷,且可重复使用。相比于常规的金属螯合亲和层析,金属螯合磁珠可以避免复杂的操作,省去填柱以及上柱等步骤,只需要简单的混合以及磁吸附便可以实现蛋白质快速分离和提取。
本期研究计划制备多种工艺更简便稳定的新型磁性微珠,并利用这些磁性微珠提取分离样品中的组氨酸标签蛋白,再进一步检测纯化的蛋白质的含量及功能。
2. 毕业设计(论文)主要任务及要求
1. 查阅不少于15篇的相关资料,其中英文文献不少于3篇,完成开题报告;
2. 寻找简单合适的方法合成多种新型的磁性微粒,并表征分析;
3. 对比多种新型的磁性微粒对组氨酸标签蛋白的提取效果;
3. 毕业设计(论文)完成任务的计划与安排
第1-2周:调研阅读资料,准备开题
第3周:开题,准备实验用品。
提交阶段性报告
4. 主要参考文献
1. tural s, tural b, demir as. heterofunctional magnetic metal-chelate-epoxy supports for the purification and covalent immobilization of benzoylformate decarboxylase from pseudomonas putida and its carboligation reactivity. chirality. sep 2015;27(9):635-642
2. design and characterization of ni2 and co2 decorated porous magnetic silica spheres synthesized by hydrothermal-assisted modified-stober method for his-tagged proteins separation
3. overview of tag protein fusions: from molecular and biochemical fundamentals to commercial systems. applied microbiology and biotechnology. terpe k. jan 2003;60(5):523-533.