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摘 要

本研究以黄瓜藤的60%乙醇提取物为材料，对其黄酮、多酚含量进行了测定，同时测定了黄瓜藤醇提物对超氧阴离子、羟基自由基、DPPH自由基的清除作用和总还原力。结果表明：黄瓜藤醇提物中含有较多的黄酮、多酚等活性物质，其中含量最高的是黄酮，其次是多酚，分别为53.72 mg/g、15.9 mg/g。同时发现，黄瓜藤醇提物不仅有较高的还原力，而且还对DPPH、超氧阴离子、羟基自由基均具有较强的清除力，并且还原作用和清除作用与醇提物浓度呈正相关性。这为黄瓜藤醇提物作为天然抗氧化剂的来源提供了可能，也为其作为功能食品和美容产品等的开发利用提供了理论依据。

关键词：黄瓜藤，抗氧化活性，自由基

Abstract: In this study, cucumber vine was extracted by 60% ethanol and total flavonoid and pheolic content was determined. Moreover, the scavenging activity of 60% ethanol of cucumber vine on superoxide anion, hydroxyl radicals, DPPH free radicals, and the reducing power capacity were determined. The results showed that the ethanol extracts of cucumber vine contained large amounts of polyphenols and flavonoids and other active substances. Among them, flavonoids are the highest content, followed by polyphenols, which respectively is 53.72 mg/g and 15.9 mg/g. The study also found that ethanol extracts of cucumber vine not only have high reducing capacity, but also have strong scavenging on DPPH, superoxide anion, hydroxyl radicals. Moreover, there is a positive correlation between reduction and scavenging effect with the concentration of ethanol extracts. This also provides the possibility for ethanol extracts of cucumber vine as natural antioxidants and provides theory basis for the development and utilization that can as functional food and cosmetics.

Key words: cucumber vine, antioxidant activity, free radical

目录

1 引言 4

2 材料 5

2.1 材料 5

2.2 主要试剂和仪器 5

3 方法 5

3.1 黄瓜藤醇提物的制备 5

3.2 黄瓜藤醇提物中黄酮含量的测定 5

3.2.1 标准曲线的制作 6

3.2.2 样品中黄酮的含量 6

3.3 黄瓜藤醇提物中多酚含量的测定 6

3.3.1 标准曲线的制作 6

3.3.2 样品中多酚的含量 6

3.4 黄瓜藤醇提物活性成分抗氧化测定 6

4 结果与分析 8

4.1 黄瓜藤醇提物中黄酮含量 8

4.2 黄瓜藤醇提物中多酚含量 8

4.3 总还原力测定 9

4.4 黄瓜藤醇提物对自由基的清除作用 9

结论 12

参考文献 13

致谢 15

1 引言

随着自由基与疾病关系深入研究，人们对抗氧化剂关注也不断增强。研究表明，如心脑血管病、衰老、癌症、类风湿、关节炎、帕金森症等疾病发生均与自由基有关^[1]。

自由基是人体的代谢产物，可以造成生物膜系统损伤以及细胞内氧化磷酸化障碍，是人体疾病、衰老和死亡的直接参与者，对人体的健康和长寿危害非常大^[2]。自由基是一系列独立存在的有一个或几个不配对电子的原子或基因，因此具有极高的化学活性，为了维持自身的稳定，必须从其他的原子中抢夺电子，从而引起一系列反应，发生氧化作用^[3]。总的来说，自由基主要来源于几个方面：抽烟及二手烟、酗酒；辐射、紫外线、电磁波、日光的暴晒，或是癌症或者在接受的放射线治疗，都可以产生自由基；环境污染，像水污染、空气污染、土壤污染等；化学药物的滥用，如农药、化肥、食品添加剂、药品等的滥用；人的精神状态，像焦虑、紧张、郁闷、压力大等情绪也会产生一定的自由基。生物体内的自由基主要有活性氧、氧自由基及活性氮自由基，包括氧气、超氧阴离子自由基、羟基自由基、脂质过氧化物自由基等。抗氧化就是任何以低浓度存在就能有效抑制自由基的氧化反应的物质，其作用机理可以是直接作用在自由基，或是间接消耗掉容易生成自由基的物质，防止发生进一步反应。多数抗氧化剂都是有效的自由基终止剂，主要作为氢给予体育一些自由基反应，使自由基转变为非活性或较为稳定的化合物，从而干扰或延滞反应中的链增长步骤，达到抑制氧化的目的，因而能够有效灭活自由基^[4]。所以适当地补充外源抗氧化剂如黄酮、多酚类化合物，清除过剩的自由基，可以对生物体产生一定的积极作用^[5]。

黄酮是在自然界中广泛分布的一类化合物。现在已知的黄酮类化合物有4000多种，在植物体中常以游离态或与糖结合成苷的形式存在^[6,7]。黄酮类化合物一般可分为黄酮醇、黄酮、黄烷酮、黄烷醇、花色素、异黄酮、二氢黄酮醇以及查尔酮等八类^[8]。有关于黄酮类化合物功能的报道很多，主要有抗菌、抗过敏、镇痛、清除自由基、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒等，现在国内外很多研究人员从不同植物中提取出具有生物功能活性的黄酮类化合物^[9-14]。生物类黄酮还与维生素C有协同效应，可以使维生素C在人体组织中趋于稳定。

植物多酚是植物体内的具有独特生理活性和药理活性的复杂酚类次生代谢物^[15]，具有多元酚结构^[5]，主要存在于植物的皮、根、叶、果中，在植物中的含量仅次于纤维素、半纤维素和木质素。抗氧化性是植物多酚一个重要性质，由于植物多酚酚羟基中邻位酚羟基极易被氧化，且对活性氧等自由基有较强捕捉能力，是植物多酚有很强抗氧化性和清除自由基能力^[16]。

黄瓜藤一年生蔓生草本。茎枝伸长，有纵沟及棱，被白以硬糙毛。卷须细，不分枝，具白色柔毛。单叶互生；叶柄稍粗糙；叶片三角状宽卵形，膜质，长、宽均12-18cm，两面甚粗糙，掌状3-5裂，裂片三角形并具锯齿，有时边缘具缘毛。花萼简狭钟状圆筒形，密被白色长柔毛，花萼裂征钻形，开展与花萼近等长；花垸共同白色，长约2cm，花冠裂片长圆状披针形，急尖；雄蕊3，花丝近无；雌花单生，或稀簇生，花梗粗壮，被柔毛。子房纺锤形，柱头3。果实长圆形或圆柱形，长10-30（-50）cm，熟时黄绿以，表面粗糙，具有刺尖的瘤状凸起，极稀近于平滑。种子小，狭卵形，白色，无边缘。花、果期为夏、秋季。据古书记载，黄瓜藤具有扩张血管、降低血压等功效，但此前还没有关于黄瓜藤抗氧化方面的研究。有实验研究表明，黄瓜藤醇提物中的黄酮、多酚等活性成分的含量较高，并且容易提取^[17]。

2 材料

2.1 材料

取自淮安市丁集镇夏季的新鲜黄瓜藤（侧枝带叶子的）。洗净，60 ℃恒温烘至恒重，粉碎（过90目筛），待用。

2.2 主要试剂和仪器

无水乙醇，葡萄糖，苯酚，铝片，碳酸氢钠，蒸馏水，浓硫酸，芦丁，氢氧化钠，没食子酸，福林酚试剂，碳酸钠，抗坏血酸，草酸，2,6 - 二氯酚靛酚，磷酸盐缓冲液（PH 6.6），铁氰化钾，三氯乙酸，三氯化铁，邻苯三酚，Tris-HCl缓冲液，浓盐酸，硫酸亚铁铵，邻二氮菲，双氧水，DPPH等，以上这些试剂都为分析纯。

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