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摘 要

采用24h换水式急性毒性试验方法，研究了乙醇对克氏原螯虾（Procambarus clarkia）的急性毒性作用。计算相应的半致死浓度(LC₅₀)和安全浓度(SC)。实验表明，在水温12℃，pH 7.8的条件下，本试验用克氏原螯虾对于乙醇的耐受性随时间增加而明显降低，乙醇对于克氏原螯虾60h、72h、84h、96h的半致死浓度分别为15.69mL/L、14.40mL/L、13.26mL/L、12.18mL/L；安全浓度为2.0mL/L。

关键字：克氏原螯虾，乙醇，急性毒性

Abstract: Following the 24h in water type acute toxicity test methods to do research on the Acute Toxicity of ethyl alcohol to Procambarus clarkia. Calculate the corresponding median lethal concentration(LC₅₀)and safe concentration(SC). The experiment results showed that, in conditions of water temperature 12 ℃,pH 7.8, this experiment"s original crayfish for ethanol tolerance significantly decreased with the increase of time, the 60h LC₅₀,72h LC₅₀,84h LC₅₀ and 96h LC₅₀ were 15.69mL/L,14.40mL/L,13.26mL/L and 12.18mL/L.The safe concentration was 2.0mL/L.

Keywords: Procambarus clarkia,ethyl alcohol,Acute toxicity

目录

1 引言…………………………………………………………………4

2 材料与方法…………………………………………………………4

2.1 试验动物…………………………………………………………4

2.2 试验用水…………………………………………………………4

2.3 试验药品…………………………………………………………4

2.4 试验器材…………………………………………………………4

2.5 试验方法…………………………………………………………5

2.6 数据处理…………………………………………………………5

3 结果与分析…………………………………………………………5

3.1 克氏原鳌虾的中毒症状…………………………………………5

3.2 乙醇对克氏原螯虾的急性毒性作用……………………………6

讨论……………………………………………………………………9

参考文献………………………………………………………………10

致谢……………………………………………………………………11

1 引言

克原氏螯虾又称淡水龙虾，分类上隶属于甲壳纲，十足目，螯虾科,是目前国内最受消费者喜爱的淡水水产品之一。对生长坏境要求很低，耐农药、有机物和重金属污染^[1]克氏原螯虾原产北美洲，在二十世纪三十年代末由日本传入我国，但由于克氏原螯虾过去一直被认为是一种污水生物而得不到消费者的认可，使得该虾受到的捕抓压力极小，致使其在我国国内的分布区得以不断扩大，并被认为是我国十大外来入侵水生物种之一^[2]。但近20年来，随着克氏原螯虾的国际和国内市场需求持续增长，其天然资源已不能满足市场需求，巨大的市场需求导致了对克氏原螯虾的高强度捕捞，加之环境污染等因素的影响，使其自然资源急剧减少，供求矛盾促使其价格直线攀升，也促进了广大水产养殖户对克氏原螯虾的养殖热情，养殖户们开始大面积养殖。其适应性广、繁殖力强的特点已促使克氏原螯虾成为我国重要的水产养殖对象之一。

目前国内外学者对克氏原螯虾的发育、生态、毒性和污染生物指示等进行了较多的研究^[3-4]，乙醇经常被用作毒理学试验的助溶剂，然而针对乙醇对克氏原螯虾毒性影响的研究报道较少，所以，本试验通过研究常用溶剂乙醇对克氏原螯虾的96h急性毒性，了解乙醇对其的半致死浓度和安全浓度，旨在为水生毒理学研究提供数据参考。

2 材料与方法

2.1 试验动物

试验用克氏原螯虾采于江苏省新大运生态农业开发有限公司所属养殖基地（盱眙）。在实验室水生动物养殖系统中用经过充分曝气除氯的自来水暂养2-3d，暂养期间不喂食。挑选出活力较好，附肢完整的克氏原螯虾进行实验。实验虾体质量18.02±1.57g/尾，体长7.07±0.60cm/尾。

2.2 试验用水

充分曝气除氯的自来水。pH 7.8，温度为12±1℃（各项指标都能保证克氏原螯虾的正常生命活动）。

2.3 试验药品

无水乙醇（C₂H₆O分析纯）购于国药集团化学试剂有限公司。

2.4 试验器材

电子天平、充气泵、温度计、SX-620型笔式pH计、58cm×37cm×35cm玻璃养殖缸等。

2.5 试验方法

本次实验分为两个部分，分别为预试验和正式试验。预实验的目的在于确定正式试验乙醇的浓度区间。正式试验在预试验所得到的区间中，按等间隔设置4个浓度梯度和1个对照组（见表1），每个浓度设置2个平行组，试验结果取其平均值。每个浓度中随机放入8尾试验用虾，每个试验组共为16尾。试验期间不喂食，每隔24h换一次水，重新配置乙醇浓度。试验过程中，前12h每隔2h观察一次，记录虾的异常行为和体色变化等现象，及时清理死虾和废物。然后每隔4h观察一次。记录24h、48h、72h、96h各个浓度的死亡数，计算死亡率，以克氏原螯虾俯卧或侧卧于箱底，腹肢和触角都不摆动，用玻璃棒碰触虾体和其触角时，无任何反应时判定为死亡^[5]。控制养殖系统内的各项指标稳定。

表1 正式试验乙醇的暴露浓度

编号	对照	1	2	3	4
乙醇浓度（mL/L）	0	12	16	20	24

2.6 数据处理

试验结束后，根据克氏原螯虾的死亡时间以及相对应的死亡只数，采用Excel 2003软件进行数据库的建立和数据的录入。利用软件中的程序分别作出60h、72h、84h、96h的折线图，计算出回归方程，并且计算出半致死浓度和安全浓度。

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