论文总字数：7523字

摘 要

本研究通过对黄瓜生境内在盐碱条件下能够影响黄瓜耐盐性的菌种进行分离，并对其嗜铁素活性、产吲哚乙酸（IAA）、解有机磷、无机磷能力进行测定，旨在筛选能够协助植物缓解盐胁迫的促生菌株。本研究的主要结果如下：从黄瓜上分离得到844种细菌，从盐地生境分离得到642种细菌，共计1486种菌。其中产生嗜铁素活性的细菌占59.97%，产生解有机磷活性菌株占23.72%，解无机磷活性的菌株占11.89%，产生吲哚乙酸（IAA）活性细菌占9.52%。本研究结果为耐盐性促生菌在实际生产中的应用提供基础。

关键词：微环境 ，盐胁迫， 离体筛选

Abstract: In this study we aimed at screening plant-growth promoting rhizobacteria from saline soil. First bacteria strains were isolated from the soil samples and the activity of siderophore, IAA, organic phosphorus, inorganic phosphorus were determined. According to the results, 844 strains were isolated from cucumber and 642 strains were isolated from saline soil. Among these strains , 59.97% bacteria showed siderophore activity, 23.72% strains showed organic phosphorus activity, 11.89% strains showed inorganic phosphorus activity and 9.52% strains had IAA activity. These data will provide theoretical guidance for agricultural production.

Keywords： Microenvironments, Salty stress, In-vitro screening

目 录

1 前言 5

2 材料方法 5

2.1 黄瓜品种 5

2.2 黄瓜生境细菌的分离 5

2.4 细菌产酶及代谢产物能力测定 6

2.5 耐盐性测定 7

3 结果 7

3.1 黄瓜生境中菌株分离结果 7

3.2 盐碱地生境菌株分离结果 8

3.3 嗜铁素活性、产IAA、解有机磷、无机磷测定结果 9

结 论 11

参 考 文 献 12

致谢： 13

1 前言

土壤盐渍化是世界性的问题，根据相关资料统计，盐碱化的土壤约占全世界7%^[1]，而且耕地也在不断的流失盐碱化，我国作为农业大国，正在面临着土壤盐碱化加剧的问题，盐碱化土壤约占全世界耕地的10%，尤其是华北平原，东北平原和西北内陆等地区。因此，研究农作物的耐盐机制以及开发耐盐能力高的农作物产品具有重要意义^[2]，如何解决土壤盐碱化问题迫在眉睫。

植物根际促生菌（plant growth promoting rhizobacteria，PGPR）是一类生活在植物根际能够促进植物生长的有益细菌^[3]。国内对于PGPR的研究主要集中在农作物病虫害的防治与增加产量方面^[4－5]，对PGPR在盐碱化土壤植物增产方面也有相关研究。本研究拟从黄瓜植株以及盐碱地分离植物促生菌，通过定向筛选出具有嗜铁素活性、吲哚乙酸（IAA）活性、解有机磷活性、解无机磷活性的PGPR，充分发挥这一生物改良资源，为改良土壤中微生物种群^[6]，利用土壤生物修复减轻土壤盐害的不利影响提供理论依据。

2 材料方法

2.1 黄瓜品种

津优“35”（天津科润黄瓜研究所研制）。

2.2 黄瓜生境细菌的分离

采样地点：淮安市丁集镇。

采集黄瓜根围土、根内、根表、茎表、茎内、叶围和叶内分离细菌。

2.2.1 细菌分离方法：

取3 g样品，放入灭菌的三角瓶中，加27 ml无菌的0.85% NaCl，灭菌玻璃珠3 g，于摇床上120-150 rmp振荡30 min后，静置5 min，得到10-1稀释液，吸取100 μl加入到900 μl 的无菌0.85% NaCl中，混匀即为10^-2样品稀释液，依次类推，制备10^-3、10^-4、10^-5、10^-6 稀释液。分别取10-⁴、10^-5、10^-6三个梯度的稀释液吸100 μl 涂布在R₂A培养基上（R₂A培养基（1 L）：酵母粉0.5 g，酪蛋白胨0.25 g，肉蛋白胨0.25 g，水解酪蛋白0.5 g，葡萄糖0.5 g，淀粉0.5 g，丙酮酸钠0.3 g，磷酸氢二钾0.3 g，水合硫酸镁0.024 g，琼脂15 g，pH=7.2），每个梯度3个重复，30°C培养48 h。

选菌落数在30-300个的平板，计数，挑取平板上所有的单个菌落分离、纯化，40%甘油保存于-70°C超低温冰箱中，备用。

2.2.2 内生细菌的分离

分别取样品若干，用1%的次氯酸钠浸泡5 min，70%酒精浸泡1-2 min，无菌水清洗3次（取最后一次清洗的溶液100 μl涂于R₂A平板上培养，若48 h后无菌生长则认为表面消毒干净，无菌）。取3 g消毒好的样品置于菌研钵中，加入27 ml无菌的0.85% NaCl，浸软组织，研磨，用无菌的0.85% NaCl梯度稀释。取10^-1、10^-2、10^-3三个梯度的稀释液各100 μl涂于R₂A上，每个梯度3个重复，30°C培养48 h。

选菌落数在30-300个的平板，计数，挑取平板上所有的单个菌落分离、纯化，40%甘油保存于-70°C超低温冰箱中，备用。

剩余内容已隐藏，请支付后下载全文，论文总字数：7523字