海洋细菌Pedobacter sp.NJ-02中卡拉胶酶重组表达及性质研究开题报告
2020-07-05 17:21:56
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
本研究的意义和影响:卡拉胶寡糖的酶制剂由于其多种生理活性而受到越来越多的关注。酶活性高、稳定性好的酶制剂研究迫在眉睫。在这项工作中,一个新的j-carrageenase鉴定及特征元素从海洋细菌pedobacter海南nj-02。活性高的酶可能是生产卡拉胶寡糖的一种有价值的工具。
卡拉胶是由 1 ,32β2d2吡喃半乳糖和 1 ,42α2d2吡喃半乳糖作为基本骨架 ,交替连接而成的硫酸线性多糖 ,主要存在于红藻纲中的麒麟菜属、角叉菜属、杉藻属和沙菜属等的细胞壁中[ 1 ] 。根据其二糖单元上所含的硫酸基团的数量和内醚环的有无 ,可将卡拉胶分为κ2ι、2、λ2、γ2、υ2、φ2、ξ2和ω2卡拉胶等类型 ,工业生产和使用的主要为κ2卡拉胶ι、2卡拉胶和λ2卡拉胶 3 种。κ2卡拉胶由 1 , 3 连接的 42o2硫酸2β2d2半乳糖和 1 ,4 连接的 3 , 62内醚2α2d2半乳糖交替连接而成。κ2卡拉胶酶 ( ec 3 . 2 . 1 . 83) 主要来源于海洋细菌 ,通过断裂κ2卡拉胶的β21 ,4 糖苷键降解κ2卡拉胶。κ2卡拉胶酶的用途广泛 ,如红藻细胞壁结构分析、红藻原生质体制备和κ2卡拉胶寡糖制备等。κ2卡拉胶寡糖及其衍生物具有很多很好的生物活性 , 如抗病毒[ 4 ] 、抗肿瘤[ 5 ] 、免疫调节 等。kang 等[7]分离出的芽孢杆菌bacillussp.syr4,能够利用海藻废水作为碳源,通过降解琼脂、卡拉胶,过分离产生 7~10 wt%的生物乙醇。卡拉胶是一种红藻多糖,主要存在于红藻纲中的麒麟菜属、角叉菜属、杉藻属和沙菜属等生物的细胞壁中。卡拉胶是由1,3-β-d-吡喃半乳糖和1,4-α-d-吡喃半乳糖作为基本骨架,交替连接而成的硫酸线性多糖。目前能够工业化生产的主要有κ-型、ι-型和λ-型三种卡拉胶,并已广泛应用于食品、化工等行业。近年来,人们发现不同聚合度的卡拉胶寡糖具有多种药理活性,有望发展为新一代的海洋药物。卡拉胶多糖的降解通常有酸水解和酶解两种方法,其中酶解反应条件温和、专一性强,已受到广泛关注。
现已经报道的能够产生卡拉胶降解酶的微生物绝大部分都是海洋细菌,包括假交替单胞菌属 pseudoaltermonas[3,10]、假单胞菌属 pseudomonas[11]、噬纤维菌属 cytophaga[12]、弧菌属 vibrio[13] 、交替单胞菌属 alteromons[1] 和zobella[14]。
2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
海洋细菌pedobacter sp.nj-02中卡拉胶酶分离纯化
用esi-ms分析结果表明,酶将卡拉胶寡糖的生产潜力分析
海洋细菌pedobacter sp.nj-02中卡拉胶酶性质研究
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