论文总字数：21192字

摘 要

苯胺是工业生产中的一种重要中间体，大量含有苯胺及其衍生物的废水排入自然环境中，会对水域及周边土壤造成严重污染，危害人体健康。如何安全、高效地降解苯胺及其衍生物是现今环境学家们急待解决的问题。本实验对从活性污泥中筛选出的降解苯胺的功能菌MC-01以葡萄糖为碳源，蛋白胨为氮源，温度30℃，pH6.0为最适生长条件进行培养，前期实验数据表明，转速对其生长影响不明显。选用国标N-(1-萘基)乙二胺偶氮分光光度法检测苯胺无机盐液体培养基中的苯胺浓度，准确率可达94.58%。经上述条件培养后，在浓度为500mg/L，pH8.5的苯胺无机盐培养基中接入4%的生长菌液，温度45℃，转速160 r/min，并加入蛋白胨，样品中苯胺的降解率可达41.11%。

关键词：苯胺降解菌 最适生长条件 苯胺检测 最适降解条件

The impact and research of different culture conditions on degradation of aniline degrading bacteriaMC－01

ABSTRACT

Aniline is an important intermediate in the industrial production , a large number of aniline waste water was discharged into the natural environment ,becausing serious pollution to the waters and the surrounding soil, and harm to human health . How to decompose aniline and its derivatives safely and effectively are the most pressing problem of today's environmental scientists. In the experiment , a highly effective aniline degrading bacterium MC-01 was optimized for cultivation. The result shows aniline degrading bacteria optimum growth temperature is 30℃, optimum growth pH is 6.0, optimum carbon source is glucose,optimum nitrogen source is peptone.The rational speed has almost no effect on the speed of growth. With N-(1-naphthyl) ethylenediamine azo spectrophotometric method detecting aniline inorganic salt concentration of aniline in liquid medium,the accuracy can reach 94.58%. On nutrient broth liquid medium in the optimum condition, 4% inoculated quantity，and then transfer to the inorganic salt medium, In fungus age of 12 h, , inorganic salt medium pH 8.5, aniline concentration 500mg/L,culture conditions of 45 ℃, and 160 r/min, with peptone as nitrogen source，the rate of aniline degradation is 41.11%.

Keyword: aniline degrading bacteria ; optimum growth conditions;

aniline degradation; the optimal degradation

目 录

摘 要 I

ABSTRACT II

目 录 III

第一章 文献综述 1

1.1苯胺降解的研究背景 1

1.1.1苯胺的来源及危害 1

1.1.2苯胺的处理方法 1

1.2苯胺降解菌的研究现状 1

1.3生物降解苯胺的降解机理 2

1.4菌株的分离与鉴定 3

1.4.1菌株的分离 3

1.4.2菌株的鉴定方法 3

1.5单因素试验 4

1.6正交试验 4

1.7 N-(1-萘基)乙二胺偶氮分光光度法 5

1.8本实验的研究意义 5

第二章 苯胺降解菌MC-01生长情况的初步研究 6

2.1实验材料 6

2.1.1 实验试剂 6

2.1.2 实验仪器 6

2.2实验方法 7

2.2.1菌种来源及培养基 7

2.2.2绘制苯胺降解菌MC-01的生长曲线 7

2.2.3 不同碳源对苯胺降解菌MC-01生长的影响 7

2.2.4 不同氮源对苯胺降解菌MC-01生长的影响 7

2.2.5不同pH值对苯胺降解菌MC-01生长的影响 8

2.2.6 不同温度对苯胺降解菌MC-01生长的影响 8

2.3结果与讨论 8

2.3.1苯胺降解菌MC-01的生长曲线 8

2.3.2 苯胺降解菌MC-01生长的最适碳源 9

2.3.3 苯胺降解菌MC-01的最适氮源 10

2.3.4 苯胺降解菌MC-01最适生长pH 10

2.3.5 苯胺降解菌MC-01的最适生长温度 11

第三章 N-(1-萘基)乙二胺偶氮分光光度法 13

3.1 实验材料 13

3.1.1 实验试剂 13

3.1.2 实验仪器 13

3.2 实验方法 14

3.2.1 培养基及试剂 14

3.2.2苯胺降解标准曲线绘制 15

3.2.3苯胺浓度检测方法验证（加样法） 15

3.3 结果与讨论 15

3.3.1 苯胺标准曲线 15

3.3.2 苯胺浓度检测方法验证表 16

第四章 苯胺降解菌MC-01降解情况的初步研究 17

4.1 实验材料 17

4.1.1实验试剂 17

表4-1 主要实验试剂 17

4.1.2 实验仪器 17

4.2实验方法 18

4.2.1培养基 18

4.2.2不同碳源对苯胺降解率的影响 18

4.2.3不同氮源对苯胺降解率的影响 18

4.2.4不同pH对苯胺降解率的影响 19

4.2.5不同温度对苯胺降解率的影响 19

4.3 结果与讨论 19

4.3.1不同碳源条件下苯胺的降解率 19

4.3.2不同氮源条件下苯胺的降解率 20

4.3.3不同碳氮源综合作用条件下苯胺的降解率 21

4.3.4不同pH值条件下苯胺的降解率 22

4.3.5不同温度条件下苯胺的降解率 23

第五章 结论与展望 25

5.1 结论 25

5.2 工作展望 25

参考文献 26

致 谢 29

第一章 文献综述

1.1苯胺降解的研究背景

1.1.1苯胺的来源及危害

苯胺,是一种无色(或浅黄色）透明的、液态状的、具有弱碱性和较强毒性的单环芳香胺, 化学式为 。在空气中经过高温或光照容易被氧化，颜色由无色（或浅黄）逐渐变为棕色。苯胺是重要的有机化工原料^[1]，工业生产的高速发展导致大量的苯胺及其衍生物排放至环境中^[2]，常温下呈油状的苯胺液体很容易渗入土壤中，由于其在土壤中难以降解，进而导致土壤被污染，加剧了土地资源的紧张；苯胺还易挥发，飘散到空气中影响空气质量；含有苯胺的工业废水不断地排入自然界中,破坏了水系的生态平衡，同时水污染还会对人类造成直接或间接的不利影响。若人体不慎吸入苯胺蒸汽，则会导致血红蛋白携氧能力下降，抑制中枢神经系统，影响身体健康^[3]。与此同时，苯胺还是致癌物，会诱发白血病。由于苯胺来源广，毒害大，世界上许多国家已对本国工业排水中的苯胺含量明确提出控制要求^[4]。

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