基于脯氨酸效应的枯草芽孢杆菌脂肪酶A定点突变改造研究文献综述
2020-04-13 17:05:00
文 献 综 述 前言 枯草芽孢杆菌脂肪酶 A是第一个获得晶体结构解析的芽孢杆菌脂肪酶,它的酶学性质、催化机理、稳定性以及立体选择性是近年来研究的热点。
由于其在食品、医药、化工等领域具有良好的应用前景,作为生物催化剂而日益受到广泛关注。
野生型BSLA存在表达量低、立体选择性差等问题。
近年来,通过定向进化和迭代饱和突变等分子生物学手段对BSLA进行改造,提高其立体选择性已成为研究热点。
脂肪酶(1ipase, EC3.1.1.3)即三酰基甘油酰基水解酶,是一种特殊的酯键水解酶,可在油水界面上将底物脂水解,生产脂肪酸和甘油,甘油单脂或二脂。
脂肪酶的活性中心是疏水性的,通常被一层称为盖子结构的亲水氨基酸所覆盖,当在油水界面时,盖子会打开,将活性中心暴露出来,与有机相中的底物相结合。
多数脂肪酶的催化中心是由 Ser-His-Asp 组成的三联体结构。
由于其具有高效专一,反应条件温和等多方面优势,因而被广泛应用在食品工业、造纸、日化以及生命科学领域。
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是研究最为广泛的原核生物,也是第一个被测定基因组序列的革兰氏阳性细菌。
最为有价值的是作为一种蛋白表达系统,可以分泌表达同源或异源蛋白到培养基中,并被美国食品和药品监督局(FDA)划分为一种 GRAS(Generally Regard As Safe)微生物。
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