1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述

1.1 研究目的及意义

本实验主要研究蔗糖异构酶在枯草芽孢杆菌中的构建表达。实验将为构建食品级的安全宿主提供重要理论和实验数据，对异麦芽酮糖的工业化生产具有重要应用价值。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

本课题组已筛选到的一株异麦芽酮糖主产型菌株erwinia rhapontici nx-5，并克隆得到其基因序列在大肠杆菌工程菌中实现成功表达，有比较成熟的分子生物学实验基础。本文以实现siase的食品安全性表达为主旨，拟通过分子生物学手段以成功构建重组质粒，转化等方法实现蔗糖异构酶在枯草杆菌中的表达，使其可应用于异麦芽酮糖的工业化生产，降低生产成本。这对加快我国甜味剂市场的发展，完善和加强功能性食品开发有重要意义。具体的研究内容如下：

（1）设计引物，分别从本课题组筛选到的异麦芽酮糖主产型erwinia rhapontici nx-5和p43nmk质粒中克隆得到siase基因和p43启动子序列，重叠pcr得到含有p43启动子的siase基因片段。

（2）选择大肠-枯草穿梭质粒pma5为载体，连接，转化构建含有p43启动子的pma5-p43-siase重组质粒。