1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

1.研究背景 甜味剂是食品添加剂和动物饲料行业中的一项重要产品，在世界范围内的应用量位居各添加剂之首，传统的甜味剂如蔗糖，一般都具有高热量、高吸收率，被认为是引起肥胖症、糖尿病、心血管疾病、龋齿等的一项重要因素。

d－阿洛酮糖是一种自然界天然存在极少的稀有糖，其食用后不易被人体代谢，几乎不产生能量，无腐蚀，而且具有良好的食品加工特性，作为一种新型的功能性甜味剂配料，在食品开发中可以替代传统甜味剂，成为功能性食品添加剂研究领域的一项热门内容。

为了进一步研究d－阿洛酮糖的性质，推动其在食品领域中的应用，获得大量、价格合理、纯度较高的d－阿洛酮糖便尤为重要。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

2.1本课题要研究或解决的问题 用d－果糖为底物，通过d－塔格糖－3－差向异构酶家族，生物酶法转化大量生产d－阿洛酮糖，然后利用阳离子交换树脂及其他方式实现d-果糖与d-阿洛酮糖的分离纯化与结晶。

2.2研究手段和途径 首先构建实验所需重组菌pet28a-dpe ，诱导表达后，离心破碎获得反应所需粗酶液，将其加入到一定浓度的果糖溶液中，在该酶最适温度等条件下进行生物酶催化反应。

反应结束后先通过加热煮沸的方法使酶失活抽滤出酶，然后向溶液中加入酵母去除其中的大部分果糖，后利用ca2 型阳离子交换树脂除去溶液中剩余的果糖溶液及溶液中所含的酸，实现d-阿洛酮糖溶液的纯化，然后对已纯化的溶液进行浓缩结晶，获得所需d-阿洛酮糖晶体。