摘 要

本论文通过对酚酞检测方法的研究，研制出适合减肥产品中酚酞快速测定的试剂盒。采用薄层色谱（TLC）法，用无水乙醇作溶剂溶解供试品，以GF254硅胶板为固定相，展开剂选用甲苯－乙酸乙酯－异丙醇－浓氨试剂（14：5：3：0.5）的混合溶液，最后以氢氧化钠溶液为显色剂。最后采用高效液相色谱质谱联用法对样品中酚酞进行定性和定量分析，并对薄层色谱（TLC）法进行数据确认。从实验结果可看出，酚酞的最低检出限为0.05μg；用所建立的TLC法分别对减肥保健食品中8种产品进行酚酞的检测，3种检测出酚酞，用LC-MS/MS法复检均检测出酚酞。TLC法具有快速、操作简单、成本低、灵敏度高等优点，可作为减肥保健食品中酚酞快速检测试剂盒的核心方法。

关键词：酚酞 薄层色谱 保健食品 快检

Abstract

To establish a rapid analysis method for identification and determination of phenolphthalein added into diet food for reducing weight. Using TLC method，the sample was dissolved in anhydrous ethanol, GF254 silica gel as stationary phase, toluene ethyl acetate isopropyl alcohol ammonia reagent (14:5:3:0.5) as the agent, sodium hydroxide solution as chromogenic reagent.The LC/MS/MS was used to identify the phenolphthalein illegally added into the slimming products.Phenolphthalein minimum detection limit is 0.05 g.The established TLC method was used to test a total of 8 varieties of anti－obesity and healthcare food，among which 3 healthcare products were detected with phenolphthalein.The method has strong specificity, high sensitivity, good reproducibility,can be used as a testing method for this kind of product is added with phenolphthalein.

Key words: phenolphthalein; anti－obesity and healthcare food; analysis method; TLC

目 录

摘 要 I

ABSTRACT II

第一章 文献综述 1

1.1 前言 1

1.2 酚酞简介 1

1.2.1 酚酞的性质 1

1.2.2 酚酞的减肥机理 1

1.2.3 酚酞的检测方法 2

1.3 快速检测的方法及意义 2

第二章 酚酞快速检测方法 4

2.1 方法原理 4

2.2 仪器与试剂 4

2.2.1 主要仪器 4

2.2.2 试剂 4

2.3 样品来源 4

2.4 溶液制备 4

2.4.1 样品溶液制备 4

2.4.2 对照品储备液制备 5

2.5 TLC实验条件 5

2.6 样品测定 5

第三章 结果与讨论 6

3.1 展开剂的选择 6

3.2 抗干扰实验 7

3.3 样品测定 8

3.4 酚酞检出限检测 8

第四章 方法确认 10

4.1 稳定性实验 10

4.1.1 显色稳定性 10

4.1.2 比移值稳定性 10

4.2 快检结果确认 10

4.2.1 LC/MS/MS条件 10

4.2.2 样品制备 10

4.2.3 测定结果 10

第五章 酚酞快检试剂盒 13

5.1 试剂盒设计 13

5.2 试剂盒成本预算 13

5.3 试剂盒说明书 13

第六章 结论与展望 16

6.1 结论 16

6.2 展望 16

参考文献 17

致 谢 19

第一章 文献综述

1.1 前言

随着生活条件的改善，人类肥胖问题开始逐渐显现出来，并且人们的健康意识不断提高，希望可以摆脱肥胖的困扰，同时也意识到药物减肥对人体会产生不可避免的副作用。而以中草药制成的减肥保健食品，因为其宣传的“食疗”概念受到人们的关注，但是实际疗效并不是特别明显，往往因为减肥效果不佳，很难满足人们的减肥期望。因此，一些不法厂家为了吸引消费者，达到快速减肥的效果，往往非法在减肥保健食品中添加酚酞，导致很多消费者长时间错误选择此类产品，身体健康受到严重危害^[1]。

酚酞，在以医药领域作为泻药在使用，因为其有助于排泄，所以也会有减轻体重效果，但我国法律禁止其添加到保健减肥食品中。长期服用酚酞，药物会持续刺激胃粘膜和肠粘膜，不可避免会使肠壁受损，将会造成营养物质的吸收能力下降，造成营养物质的流失。钾、钙、镁和铁等微量元素的丢失，导致电解质紊乱，进一步可能引起肌痉挛、诱发心律失常、抵抗力下降、营养不良等并发症^[2]。女性长期服用酚酞甚至会影响生育功能，会增大不孕症发生概率。

对于酚酞的检测方法，大多集中于药学、毒理及临床等领域。而在减肥保健食品样品中的测定技术报道较少，对于酚酞快速检测的研究更少，亟需找到适用于酚酞快速筛选鉴定的方法，并研制出实际可用的快检试剂盒。因此研究食品中酚酞的快速测定试剂盒是很有意义的。

1.2 酚酞简介

1.2.1 酚酞的性质

酚酞（Phenolphthalein），别名：非诺夫他林，化学式C₂₀H₁₄O₄。酚酞是白色或浅黄色结晶粉末；无味，无臭；在空气中稳定；溶于乙醇和甲醇，几乎不溶于水。酚酞在酸性和中性溶液中为无色，与碱性溶液发生反应而呈现紫红色，极强酸性溶液中为橙色^[3]。在实验室中，把酚酞溶于95%乙醇作为酸碱指示剂在使用，变色范围PH值为8.2~10.0。

1.2.2 酚酞的减肥机理

酚酞在我国西药中允许使用，是一种接触性轻泻药，口服后在体内胃液、胆汁和消化酶的综合作用下，发生分解反应形成可溶性钠盐，产物会刺激肠壁神经，阻止水分被肠壁吸收，所以服用后会有口渴状症的发生^[4]。并且形成的产物主要作用于大肠平滑肌，促进肠内壁的推动力，达到缓泻作用^[5]。按正常剂量服用后缓泻现象一般可持续1～4日。

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