1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

文 献 综 述 1.1 前言 褐藻多糖硫酸酯是一种主链为α -l-fuc残基的硫酸化岩藻聚糖[1, 2], 主要单糖组成为岩藻糖, 其次为半乳糖, 还含有一定量或相当量的甘露糖、 鼠李糖、 葡萄糖醛酸、 葡萄糖及木糖等. 近年来, 褐藻多糖硫酸酯因其抗凝血[3~5]、 抗病毒[6, 7]、 抗肿瘤[8~10]和神经保护[11, 12]等广泛的生物活性, 而成为研究热点之一. 构效关系研究结果表明, 其生物活性与岩藻糖含量、 硫酸基取代度及相对分子量等密切相关[13~15]. 但褐藻多糖硫酸酯存在分子量大、 难以通过血脑屏障及吸收率低等缺点, 并且其组成复杂, 结构表征和质量控制有一定的难度, 因而其应用受到了一定限制。

通过对褐藻多糖硫酸酯的降解方法进行研究, 制备具有不同硫酸酯化程度的岩藻寡糖, 对于开展构效关系研究, 提高褐藻多糖硫酸酯的吸收利用效率, 开拓其新活性和应用范围具有重要意义. 随着各种软电离质谱技术的发展, 电喷雾质谱(esi-ms)已被广泛应用于糖类结构的表征[16~18]. 利用esi-ms可以快速获得寡糖的结构组成, 使寡糖结构研究更方便、 快捷. 徐祖洪等[19]提出的水提碱凝法可从海带褐藻中提取褐藻多糖硫酸酯, 已用于大规模生产并已商品化投入市场. 以海带褐藻多糖硫酸酯粗多糖为原料, 探索了稀酸水解和分离规律, 并结合渗透色谱法获得了一系列低聚合度的硫酸化岩藻寡糖片段, 为岩藻寡糖的制备和应用开辟了新思路. 研究发现岩藻多糖具有抗癌、增强免疫、抗炎、抑制神经细胞损伤、抗病毒等多种生物活性。

与多糖相比,寡糖因水溶性好、易被机体吸收利用等诸多独特的功能,近年来更受人关注,但岩藻寡糖的生物学活性讫今尚没有相关报道。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

2.2.1 寡糖的制备及酸水解条件的优化 将10 g FPS溶于300 mL H2SO4(0.2 mol/L)溶液中, 于80 ℃搅拌不同时间水解后, 中和离心, 将所得上层清液用不同浓度的几种溶剂沉降, 静置过夜后离心, 取上层清液, 旋蒸浓缩后冷冻干燥, 即为酸解得到的寡糖, 标记为SPF1; 离心所得沉淀经冷冻干燥, 即为降解后的杂多糖, 标记为SPF2. 稀酸水解和沉降条件列于表1, 分别考察了水解时间、 沉降试剂和沉降终浓度3个条件, 每个条件考察3个水平, 共计有27种不同处理方式. 2.2.2 寡糖的分离纯化 将1 g降解后的寡糖溶于4 mL碳酸氢铵(0.5 mol/L)溶液中, 用Bio-Gel P4(