摘 要

烤鱼片是在中国深受消费者喜爱的代表性休闲食品，对标签的初步分析只发现了鱼的通用名称，没有提及特定物种（表1）。由于中国对这些常见鱼类名称的定义尚未统一，因此零售商为了获取更高的利润会故意错贴烤鱼片产品的标签。

在本实验中，研究在中国市场上流通的烤鱼片产品的品种组成是采用了基于16S rRNA基因片段的直接测序方法和随后的BLAST分析。定义了一个独家标准来确定标签的准确性，只要鉴定出的物种与预期鱼类家族不符就会被鉴定为错误标签。

研究结果发现，在中国相关规定执行不力，标签错误率高达75.9%。更糟糕的是，在使用相同的名称的不同包装中，我们竟然识别出了多种鱼类，而且还从多个是单个名称包装的样品中识别出了多种鱼类。最后，为了保护消费者免遭经济损失甚至健康风险，我们建议对现有立法进行修订，并编制中国鱼品标准市场名称清单。

关键词：烤鱼片，16S rRNA，测序，标签

Abstract

Roasted fish fillet represents a popular snack food in China and a preliminary analysis of the label found only fish common names, without any reference to a particular species(Table1).Since there is still not a harmonization around the definition of these common names in China, retailers are thus induced to mislabel roasted fish fillet products for lucrative profits.

This study used direct sequencing method based on fragments of 16S rRNA gene and subsequent BLAST analysis to investigate the species composition of roasted fish fillet products circulated on Chinese market.An exclusive criterion was defined to determine the labeling accuracy and only the identified species beyond the expected family was considered as mislabeling.

Results highlighted an inadequate enforcement of relative rules and a high mislabeling rate of 75.9%.A worse fact was the identification of multiple fish species not only from several packages under the same common name,but also from several specimens belonging to a single package.In order to protect the consumers from economic loss and even health risk,we recommended the amendments to the existing legislations and the compilation of list of acceptable market names for fish species in China.

Key words: roasted fish fillet,16S rRNA,sequencing,label

目录

摘要 Ⅰ

Abstract Ⅱ

第一部分 文献综述 1

1.1中国水产品资源现状 1

1.2水产品加工 1

1.3水产品品种掺假 2

1.4基于DNA的水产品品种鉴定方法 5

1.5 研究目的 6

第二部分 材料和方法 8

2.1 采集样品 8

2.2 主要仪器 8

2.3 主要试剂 9

2.4 分子分析 9

第三部分 结果与讨论 15

3.1 DNA提取和PCR扩增 16

3.2 测序及序列分析 16

3.3物种鉴定 16

第四部分 结论与展望 18

4.1结论 18

4.1展望 18

参考文献 19

致谢 21

第一部分 文献综述

1.1 中国水产品资源现状

我国是一个渔业资源大国，据相关部门统计，在2016年，全国水产品的总产量达到了6900万吨，与去年的产量相比来说增长了3%。在这之中，养殖类水产品的产量达到了5142万吨，在总产量中的比重达到了74.5%；捕捞类水产品的产量有1758.86万吨，在总产量中占比为25.5%。全国水产品人均占有量达到50千克，和去年相比增加了1.17千克，长了2.40%^[1]。

2017年前半年我国的水产品的进口和出口总量共计达到了444万吨，同比增长了13%。而进口和出口总额达到149.3亿美元，与去年的总额相比上升了7.23%。在出口这一块，出口量是208万吨，同比增长5.8%，出口额达到98亿美元，同比增长2.1%。出口量和出口额都再次刷新了历史最高量^[2]。

鱼类是我国最主要的水产类食品原料。有数据统计，海水鱼的种类大约有1700种，其中17.6%是能获得经济效益的鱼类，经济鱼类中有60种是产量相对比较高^[1,3]。据统计，淡水养殖、海水养殖和海洋捕捞是我国鱼类原料的三个主要来源。在这之中，淡水养殖的鱼类包括有草鱼、鲢鱼、鲫鱼、鲤鱼、罗非鱼等常见鱼类；海水养殖的鱼类有鲈鱼、鲆鱼、石斑鱼、鲷鱼等；海洋捕捞的常见的鱼类有带鱼、鳀鱼、鲳鱼、鲅鱼、海鳗、小黄鱼、马面鲀、沙丁鱼、金枪鱼等^[3]。

鱼类含有丰富的营养，其富含维生素A、B和D 以及各类矿物质包括钙、碘、锌、铁和硒等^[1]。世界人均水产品食用量在上世纪60年代是每人平均9.9千克，到了上世纪90年代增长了4.5千克，即达到了14.4千克，到了2013年时已经接近20千克，到了2015年就已经超过了20千克。与此同时，中国的人均水产品消费稳定增长，在90年代每人每年平均消费水产品是14.4千克，到了2013年有了大幅度的增长，增长了23.5千克，即人均消费达到约37.9千克，1993-2013年间年平均增长率为5.0%^[3]。

1.2 水产品加工