毕 业 设 计（论 文）开 题 报 告

文 献 综 述

1.咪达唑仑相关知识

咪达唑仑化学名称：1-甲基-8-氯-6-(2-氟苯基)-4H-咪唑并[l，5-a][l,4]苯并二氮杂#17644;；英文名称：Midazolam中文别名：咪唑安定；咪唑二氮卓分子式C18H13C1FN3; 分子量：325 ;理化性质 ：本品为白色至微黄色的结晶或结晶性粉末；无臭；遇光渐变黄。在冰醋酸或乙醇中易溶，在甲醇中溶解，在水中几乎不溶。熔点为160#8212;164#176;C

。 图一咪达唑仑结构式

咪 达唑仑适用于治疗失眠症，亦可用于外科手术或诊断检查时作诱导睡眠用。本品具有抗焦虑、镇静、安眠、肌肉松驰、抗惊厥作用。特点为作用快，代谢灭活快，持续时间短。用于治疗各种失眠症、睡眠节律障碍.从该类药物被发现并应用于临床幵始，对该药物的研究就没有间断过。由于该药物的临床作用稳定，副作用相对较小，与其他药物的联合应用广泛，使该类药物的研究得到进一步关注。^[1]

2.咪达唑仑的药动、药理相关知识

本品具有典型的苯二氮#17644;类药理活性，可产生抗焦虑、镇静、催眠、抗惊厥及肌肉松弛作用。肌内注射或静脉注射后，可产生短暂的顺行性记忆缺失，使患者不能回忆起在药物高峰期间所发生的事情。有学者提出咪达唑仑作为治疗癫痫持续状态的一线药物^[2]本品作用特点为起效快而持续时间短。服药后可缩短入睡时间(一般自服药到入睡只需20分钟)，延长总睡眠时间，而对快波睡眠（REM)无影响，次晨醒后，患者可感到精力充沛、轻松愉快。无耐药性和戒断症状或反跳。毒性小，安全范围大。但长时间静脉滴注可使其血浆半衰期显著延长,且有较大的个体差异^[3]近年来临床实践证实咪达唑仑持续静脉滴注对控制儿童癫痫持续状态有确切疗效^[4].咪达唑仑口服与肌内注射均吸收迅速而完全，可分布于全身，分布容积为1#12316;2L/kg，充血性心力衰竭的患者，分布容积会增加2#12316;3倍，肥胖患者也会增加。本品的血浆蛋白结合率为97%，经肝脏代谢或与葡萄糖醛酸结合而失活，最后自肾脏排出。血浆浓度可分为两个时相,分布时相为10分钟，消除时相t1/2为1.5#12316;2.5小时，充血性心力衰竭的患者t1/2可延长2#12316;3倍。长期用药无蓄积作用，药动学数据及代谢保持不变.咪达唑仑注射液肌肉给药吸收迅速完全，生物利用度高达90%以上。本品在体内完全被代谢，主要代谢物为羟基咪达唑仑，然后迅速与葡萄糖醛酸结合，呈无活性的代谢物。60%～70%剂量由肾脏排出体外。静脉给药的稳态分布容积可达50～60升，血浆蛋白结合率约95%，血中廓清率 300～400ml/分，半衰期为1.5～2.5小时。

3.咪达唑仑的含量测定分析方法^[5]

3.1 设备与药物

Waters 600 HPLC Pump;Waters2487紫外检测器;Empower色谱工作站;BeckmanMicrofuge(r)18高速台式离心机;马来酸咪达唑仑对照品和地西泮对照品购自中国药品生物制品检定所;甲醇(色谱纯)、乙腈(色谱纯)、磷酸(优级纯)、二乙胺(分析纯)均购自天津市福晨化学试剂厂

3.2　溶液配制

咪达唑仑对照品溶液:精密称取咪达唑仑对照品5.0 mg置于100 ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,制成50μg#183;ml- 1的标准溶液。地西泮溶液:精密称取地西泮对照品10mg置于100ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,制成100μg#183;ml- 1的标准溶液。

3.3　色谱条件

色谱柱:Inertsil ODS - 3(5μm,4.6#215; 250 mm);检测波长225nm;灵敏度:2AUFS;流动相:甲醇62%和水相38%,水相含磷酸0.16%,二乙胺0.25%;流速1 mL#183;min- 1。

3.4　样品预处理

取含咪达唑仑对照品的人血浆100μL置于EP管中,加地西泮对照溶液5μL,混匀,加入乙腈200μL,涡旋混匀后,以10 000 r#183;min- 1转速离心10分钟,取上清液20μL进样。

3.5　结果

3.5.1　咪达唑仑及地西泮色谱

在上述色谱条件下得到血浆色谱图,见图2。显示咪达唑仑与地西泮峰完全分离,保留时间分别为12.86 min、19.15min,血浆中内源性物质对二者无影响

图二 咪达唑仑色谱图

3.5.2 标准曲线

取人空白血浆100μL,加适量咪达唑仑对照品溶液,配成0.4、0.8、1.6、3.2、6.4、12.8μg#183;ml- 1的系列浓度溶液,分别加入5μL地西泮溶液,按上述预处理方法及色谱条件进行测定。以测得的咪达唑仑峰面积为纵坐标,咪达唑仑浓度为横坐标进行线性回归。结果表明,样品在0.4～ 12.8μg#183;ml- 1范围内线性良好,回归方程为:Y= 15 448X 313.47,r= 0.999 3。

3.5.3精密度与回收率日内精密度及回收率

在同一天内配制成高、中、低3个浓度的咪达唑仑血浆溶液,按上述方法处理测定,分别测定3次,计算日内平均测定浓度、RSD及相对回收率。日间精密度及回收率:取3种不同浓度的咪达唑仑血浆溶液,分别在3天内进

行处理、测定,结果见图三。

图三 咪达唑仑的相对回收率和精密度(n= 3)

4 咪达唑仑的临床应用

4.1咪达哇仑用于麻醉前用药

由于临床手术的类型不同，需要麻醉药物种类较多^[6]。咪达哇仑用于麻醉前用药咪达哇仑(咪哇安定)用于成人麻醉前用药的剂量与方法通常为。.08一0.lomg#183;kg一`,术前30m行;肌注。但是有些病例人手术室后意识消失,可能与用量偏大有关。根据西山等最佳用药时间和用药量的研究结果,用量为0.08mg#183;kg一`时,最佳用药时间是入手术室前15min。对20一40岁者用药0.osmg#183;kg一#8217;、40~60岁0.O6mg#183;kg一`、60一80岁0.04mg#183;kg一`时,睫毛反射存在,无舌后坠,安全性高;并有良好的遗忘、镇痛效果。但有报告认为相同剂量下男性易于引起呼吸抑制,女青年按体重用药量大于男性。男性的遗忘效果优于女性,也有报告认为男性用药前、后血压变化大,用药量应偏小,其原因是女性脂肪组织多,药物分布容积(Vd)广以及神经质等。咪达哇仑属水溶性,作为麻醉前用药时肌注疼痛轻微,有明显的遗忘效果。术后随访患者的满意率高,多无不愉快记忆,可预防高龄患者交感神经兴奋,减少心率变化。据心理测定STA(I根据自我评价问卷调查法,测定精神紧张状态试验)研究证明,咪达哇仑可改善术前精神紧张。与地西伴(安定)相比,肌注时具有达到血药峰浓度及消退迅速,对术后无不良影响,局部吸收较稳定等优点。用于硬膜外麻醉前用药时,其镇静状态、遗忘效果、疼痛缓解等均优于经嗦。^[7]咪唑安定由于其有顺行性遗忘作用,所以即使部分患者检查过程中似乎”知晓”,但待完全清醒后却对检查过程无记忆^[8]

4.2在局部麻醉中的应用

咪达唑仑混合芬太尼具有起效快,镇静和遗忘作用强,恢复快,药物作用可以被拮抗的特点,广泛用于局部麻醉的镇静,咪达唑仑和芬太尼对患者呼吸功能的抑制具有协同作用^[9]。理想的局部麻醉镇静应能消除患者的焦虑和恐惧,使患者处于轻度睡眠状态,并产生遗忘效果,术中能保持自主呼吸和气道通畅,对身体刺激和言语命令有自主反应^[10]

4.3　纤维支气管镜(FOB)清醒插管时的应用

对有气管插管困难及饱胃或胃肠梗阻的手术患者,全身麻醉下采用清醒气管插管保持患者自主呼吸是较安全的选择。FOB是美国麻醉医师协会困难气道管理实用规则中推荐的重要工具之一,具有损伤小、成功率高等优点。FOB引导气管插管时,为确保安全有时需要患者在清醒状态下保留自主呼吸,但患者常出现精神紧张与恐惧及插入FOB时直接对气道产生机械性刺激会引起呛咳、恶心、躁动等插管反应,咪达唑仑或瑞芬太尼等预防清醒插管时机体反应有一定的效果,但仍存在插管反应偏高现象。瑞芬太尼是一种新型U受体激动剂,镇痛作用强,作用时间短,静脉注射1.0μg/kg可减轻气管插管时的心血管反应。咪达唑仑具有良好脂溶性,静脉注射30～ 100μg/kg可起到清醒镇静和顺行性遗忘等作用。由于瑞芬太尼有较强的镇痛作用,且能够增加迷走神经张力,阻断插管时损伤黏膜和喉的传入冲动,减轻插管时引起的血压升高,心率加快等心血管反应,配合使用咪达唑仑可以明显减少术中知晓的发生,减少精神上的不良刺激,提高了清醒状态下插入FOB的成功率。但咪达唑仑和瑞芬太尼都有与剂量相关的呼吸抑制作用,可使患者产生暂时性呼吸遗忘^[11,故应注意复合表面麻醉和注意注射速率和剂量。

豚鼠的过敏性实验

5.1全身主动过敏实验相关知识

在药物安全评估中，全身主动过敏实验是给致敏成立的动物静脉注射抗原，观察抗原与IGE抗体结合后导致肥大细胞、嗜碱性细胞脱颗粒、释放活性介质而致的全身性过敏反应^[12]。《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》中，对全身主动过敏实验如何进行剂量设计指导和介绍较少，笔者结合所做的注射用咪达唑仑全身主动过敏实验，对临床上不易稀释或不能稀释的药物的全身主动过敏实验计量进行探讨^[13]。

5.2豚鼠全身主动过敏性试验

5.2.1 试验方法

取正常饲养5～7d的健康活泼豚鼠随机分组，每组10只。根据指导原则要求，拟定各组供试液浓度和给药剂量。

各组动物采用腹腔注射法致敏，隔日1次，共3次，每次剂量均为0.5ml/只。于末次致敏后第14、21天，各组动物分别由趾静脉注射相应的药液进行激发，剂量均为每只1ml。激发注射液后观察60 min，最长观察时间3h。

5.2.2结果判断法

目前有两种方法：①《中国药典》2005年版一部附XⅧB中药注射液安全性检查法应用指导原则中的”过敏反应检查法”，以下简称为药典法；②《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则(二0 O五年三月)》中载明的方法，以下简称为指导原则法。这2种试验对结果的判断区别如下。

①药典法
药典法判断：(激发)静脉注射供试品后30 min内，不得出现过敏反应。如有竖毛、喷嚏、干呕、连续咳嗽3声和呼吸困难等现象中的2种或2种以上，或出现抽搐、休克、死亡现象之一者，判供试品不符合规定^[14]。

②指导原则法^[15]

过敏反应症状

实验结果评估反应分类

6.总结

对咪达唑仑注射液进行了全身主动过敏试验，可以较好的评价药物潜在的过敏情况，验证其安全性，为临床安全用药提供参考依据。

参考文献

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２．本课题要研究或解决的问题和拟采用的研究手段（途径）：

1.研究的问题

本研究对咪达唑仑注射液进行豚鼠全身主动过敏试验，观察过敏反应情况，为临床用药提供参考。

2.研究方法 ----豚鼠主动过敏试验

2.1实验动物

动物应符合国家有关规定的等级要求，并具有实验动物质量合格证。

2.2试验内容

1、豚鼠订购、分组

2、供试品的配制、检测、给药

3、致敏给药后动物症状观察

4、激发给药后动物症状观察

5、综合判定供试品的全身主动过敏情况。