宫颈癌血清生物标志物的研究文献综述
2020-04-04 12:46:07
一. 液相芯片技术
1. 液相芯片的技术原理
液相芯片技术是二十一世纪初诞生的后基因组时代产品的杰出代表,液相芯片技术平台是既能保证信息质量,又能提供相对高通量的新一代分子诊断技术平台, 这个技术平台整合了生物检测,乳胶微球荧光编码,微液体传送系统,激光实时记录,先进电脑软件和数据处理模式等多种先进技术。
液相芯片的核心技术是把微小的乳胶微球分别染成上百种不同的荧光色(固相芯片是用探针在芯片上的坐标位置给基因的特异性编码;而液相芯片则是用颜色来编码)。应用时,把针对不同检测物的乳胶微球混合后再加入微量待检测或分析标本,在悬液中与微粒进行特异性地结合。结合的结果可以在瞬间经激光判定后由电脑以数据信息的形式记录下来。因为分子杂交是在悬浮溶液中进行,检测速度极快,所以又有”液相芯片”之称。
液相芯片技术平台应用面非常广泛: 因为乳胶微球上即可以包被蛋白又可以加上核酸,所以液相芯片可以用来诊断蛋白变化(免疫反应或酶反应)也可以诊断核酸变化(DNA或mRNA)。液相芯片技术平台具有高效性:因为上百种颜色的乳胶微球可以方在同一个反应体系内,所以一小份标本(血,或其它体液,组织)可以被用来同时检测上百个生理或病理指标。液相芯片技术平台具有高敏感性:每个乳胶微球上都可以满满地(以共价键牢固结合的方式)包被上抗原、抗体、或核酸。因为探针密度高,产生的信号强,加上使用荧光检测,所以敏感性大大高于任何现有分析、诊断方法,也高于其它芯片法。
液相芯片技术平台是一种快速检测方法:因为杂交在悬浮的液相中进行,所以反应需要时间短杂交后常不用清洗就可以直接读数,所以检测效率大大高于固相杂交,所用时间从几小时缩短到十几分钟.
2. 液相芯片的特点
1、多功能性。xMAP 技术不仅能够检测核酸(DNA和RNA),还能够检测蛋白(抗体和抗原,受体和配体)。多任务性的能力使xMAP 技术特别适合在各种水平做鉴别诊断。
2、高敏感性。每一个微球体偶联了成千上万的探针,因而它能捕获更多的扩增的病原靶产物。它最少能够检测到0.2μL的PCR产物,而采用常规的典型胶分析的方法需要超过10μl的PCR产物。所以xMAP方法的检测灵敏度可以比凝胶电泳法高50倍。
3、特异性。两束激光分别分析杂交信号(敏感性)和乳胶微球上荧光颜色(特异性),而且激光只分析微球一定半径内的信息,所以检测特异性强,背景低。
4、高通量。xMAP技术能够检测多达100个不同的分析物。
5、小样本。只需要很少量的样本:如一般只需要几滴血就足够进行蛋白和核酸分析,对别的样本的需要量也很小。
6、快速。一个采用xMAP 技术的典型检测反应不超过15分钟。
7、准确。对于每一个待分析检测靶点,为了作统计学评估,系统读100个相同的颜色编码的微球体。
8、成熟技术。在乳胶微球上共价结合蛋白和核酸的技术已经经过十多年的开发。xMAP技术只是在原有技术基础上增加了荧光编码的技术。所以,与有待完善的固相芯片法相比,xMAP更成熟,更稳定。
9、价格便宜。xMAP技术的另一个特点是在大大提高了检测效率的基础上,检测试剂并不比现有方法贵。消耗品和检测仪器都比传统芯片技术便宜。
3. 液相芯片的应用
LiquiChipTM分子悬浮阵列系统是基于xMAPTM技术的微球分析平台,在此平台中可进行快速、灵敏可对单个样品进行多达100种不同指标的分析。可靠的自动化仪器,通用的试剂耗材以及顶尖级的技术支持为用户进行多重分析提供有力的保障。可以广泛应用于:
1、微生物高通量检测;
2、动植物病害检测,如禽流感、口蹄疫等;
3、临床,如SARS、肿瘤标志物、HLA分型;
4、兽药、农药残留检测;以蛋白分析为例。
液相芯片系统可用于多种基于结合反应的分析,如免疫分析,蛋白与蛋白分子相互作用分析(相互作用图谱),酶分析(如激酶分析),蛋白#8212;DNA相互作用分析以及DNA杂交反应分析。
科技名词定义
中文名称:生物标志物
英文名称:biomarker
定义:用于监测和评价能够导致生物有机体的生物化学和生理学改变的化学污染物。
应用学科:海洋科技(一级学科);海洋科学(二级学科);环境海洋学(二级学科)