耐有机溶剂脂肪酶YCJ01在大肠杆菌中高效可溶性表达及其复性体系研究开题报告
2020-05-05 17:13:07
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
一、前言 脂肪酶 (三酰基甘油酰基水解酶; ec 3.1.1.3)隶属于羧基酯水解酶类,能够逐步的将甘油三酯水解成甘油和脂肪酸。
脂肪酶存在于含有脂肪的动、植物和微生物(如霉菌、细菌等)组织中,包括磷酸酯酶、固醇酶和羧酸酯酶。
是一类催化三酰基甘油水解和/或甘油和脂肪酸之间酯化的酶[1]。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
一、本课题研究的问题 1、了解脂肪酶YCJ01的生物技术应用 2、了解脂肪酶YCJ01的特性 3、掌握现阶段常用的融合标签的种类和机理 4、如何构建高效表达的脂肪酶YCJ01重组质粒 5、菌种鉴定的方法与原理 二、拟采用的研究手段 1、查阅调研相关文献,对课题主题进行充分了解 2、通过一些期刊杂志了解到有关融合标签的一些常用的方法和最新的进展 3、借鉴尝试一些融合标签构建融入目的蛋白的重组质粒 4、通过实验操作验证目的蛋白在大肠杆菌中的表达水平 5、运用亲和层析柱进行蛋白纯化并用Western-blotting免疫印迹法进行鉴定 6、根据老师的意见及时更正实验方法,完善实验数据,并修改完善论文
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