1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

1. 核苷类药物的酶合成法

目前，世界范围内广泛认识到2#8217;-脱氧核苷酸可以作为反义药物的原材料。天然的2' -脱氧核苷酸主要来自于dna的水解。但是，这种方法中dna原来的不确定性以及复杂的提纯工艺，限制了其发展。所以最终化学方法或者酶法就取代了dna的水解作用来生产脱氧核苷酸。脱氧胸苷和脱氧脱氧尿苷能够通过化学方法很容易地合成，而且成本价格并不贵。然而，另外一些脱氧核苷，比如脱氧腺苷、脱氧胞苷和脱氧鸟苷就很难用同样的化学方法合成，所以必须用酶法合成。

目前主要有两类酶是通过生物转化的方式合成核苷类似物：n-脱氧核糖转移酶，核苷磷酸化酶。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

大量的研究表明，核苷类似物有抗病毒和抗肿瘤活性。近年来，对于这一方面的研究己逐渐成为热点之一。N-脱氧核糖转移酶催化合成和转化核苷只有一步反应，而之前报道的用核苷磷酸化酶催化核苷的转化则必须有嘌呤核苷磷酸化酶和嘧啶核苷磷酸化酶共同作用才能完成。所以本研究通过构造一个含有N-脱氧核糖转移酶II的工程菌，达到转化核苷的目的。

野生菌表达的N-脱氧核糖转移酶II的量很少，酶活很低，无法达到工业化生产的要求。利用基因工程手段，构建原核表达的工程菌，能够得到大量的N-脱氧核糖转移酶II，能够降低菌体本身的用量，增加了有效的酶催化率。之前实验室用两种核苷磷酸化酶共表达的方法来催化嘧啶碱基和嘌呤核苷之间的转化，这种方法必须两种酶基因同时表达才能达到目的，技术要求较高。本研究构建得到的N-脱氧核糖转移酶II原核表达系统，能够达到只用一种酶就达到催化嘧啶碱基和嘌呤核苷之间的转化效果，简化了实验操作要求。