摘 要

寡糖是含有少量（通常为3〜10）单糖的糖类聚合物，植物中存在很多功能性寡糖，难以被动物机内分泌的消化酶分解，但功能寡糖在许多炎症的预防以及肠道免疫系统的调节方面起着重要作用。

本课题将针对苍术不同聚合度寡糖的肠免疫活性进行研究，利用派伊尔结细胞的培养液刺激骨髓细胞的增殖以及巨噬细胞的摄取和NO毒性因子的释放来评价苍术寡糖的肠免疫活性，最终筛选出活性较好的聚合度的寡糖。

通过研究发现苍术寡糖不仅能明显改善巨噬细胞的增殖和吞噬功能，还能诱导巨噬细胞分泌一氧化氮（NO），也可刺激骨髓细胞的增殖，且不同聚合度的寡糖的肠免疫活性不同，随着聚合度的增加，寡糖的肠免疫活性降低，但相比空白对照组不同聚合度的寡糖都具有显著的肠免疫活性。且粗糖的免疫活性相比纯化后的不同聚合度的寡糖明显降低。

关键词：苍术 寡糖 肠道免疫活性 巨噬细胞 Peyer's Patch细胞

ABSTRACT

Oligosaccharides are sugar polymers containing a small amount (usually 3 to 10) of monosaccharides. Many functional oligosaccharides exist in plants and are difficult to be digested by endocrine digestive enzymes in animals, but functional oligosaccharides are used in many inflammation prevention and bowels. The regulation of the immune system plays an important role.

In this study, the intestinal immune activity of oligosaccharides with different degree of polymerization of Atractylodes macrocephala is studied. The growth of myeloid cells stimulated by the culture solution of Peyer's cells and the uptake of macrophages and the release of NO virulence factors are used to evaluate the intestinal tract of oligosaccharides. The immune activity finally screens out the oligosaccharides with better degree of polymerization.

The study found that oligosaccharides not only significantly improved the proliferation and phagocytosis of macrophages, but also induced the secretion of nitric oxide (NO) by macrophages, and also stimulated the proliferation of bone marrow cells, and the intestinal oligosaccharides with different degrees of polymerization. Different immunological activities, as the degree of polymerization increased, the intestinal immune activity of oligosaccharides decreased, but compared with the blank control group, different degrees of polymerization of oligosaccharides have significant intestinal immune activity. Moreover, the immunoreactivity of crude sugar was significantly lower than that of purified oligosaccharides with different degrees of polymerization.

Key Words:Atractylodes；Oligosaccharides；Intestinal immune activity；Macrophages；Peyer's Patch cells

目录

摘要 I

ABSTRACT II

第一章 文献综述 2

1.1引言 2

1.2寡糖 2

1.2.1寡糖的组成 2

1.2.2寡糖的分离分析技术 2

1.2.3寡糖的药理作用 3

1.3抗炎免疫药物及其作用机制 5

1.4免疫活性研究细胞模型 5

1.5研究目的与意义 6

第二章 苍术系列寡糖对巨噬细胞活性影响的研究 7

2.1引言 7

2.2实验部分 7

2.2.1实验材料与仪器 8

2.2.2实验过程 8

2.2.3数据与分析 9

2.3结果与讨论 10

2.4本章小结 11

第三章 苍术系列寡糖对原代细胞免疫活性的研究 12

3.1引言 12

3.2实验部分 13

3.2.1实验材料与仪器 13

3.2.2 实验过程 14

3.2.3数据与分析 15

3.3结果与讨论 16

3.4本章小结 16

第四章 结论与展望 17

4.1全文总结 17

4.2展望 17

参考文献 18

致谢 20

第一章 文献综述

1.1 引言

苍术（菊科）是一种中国的食用药用植物，在过去的几个世纪里，它一直被用作日常生活中制备饮料，粥和汤的原料^[1]。已有的临床应用表明它有助于改善身体健康，预防一些慢性疾病，如肝功能不全，高血糖和免疫紊乱等。在活性中，苍术寡糖的免疫调节作用引起了人们的广泛关注，可以使用体外脾细胞或巨噬细胞模型进行单独评估^[2]。现代药理学研究表明,苍术对消化系统有多种作用，苍术中的糖类成分不仅具有免疫调节作用，还能保护肝脏、降低血糖、抗菌等^[3]。正因为苍术组成复杂,并且它活性较佳，所以对苍术的研究引起人们越来越多的关注。

1.2 寡糖

1.2.1 寡糖的组成

天然存在的碳水化合物被定义为寡糖（或聚糖），该碳水化合物由直链或支链的3~10个单糖单元组成，被α-糖苷键或β-糖苷键连接。其单糖单位是果糖、半乳糖、葡萄糖或木糖。已知的普通糖例如蔗糖、麦芽糖和乳糖到低聚木糖、大豆低聚糖、壳寡糖等等组成，是人体内重要的功能性物质。