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摘 要

绿原酸（Chlorogenic acid）是一种普遍存在于植物体内的重要次生代谢产物，具有抑菌消毒、降低体内血脂血糖浓度、抗氧化、防衰老、增强人体抵抗能力等多种生物活性。绿原酸的有效提取对于其在食品、保健、药品等领域的应用有着重要意义。本实验将采用离子液体-酶法来提取金银花中的绿原酸，通过对酶类型和离子液体种类的筛选，并运用单因素实验对各种工艺参数进行优化，然后应用紫外可见分光光度法来测定提取产物的浓度。结果表明，在提取温度为40 ℃，提取时间为40 min，提取溶剂pH为4.0，果胶酶浓度为1 mg/ml，离子液体1-己基-3-甲基咪唑溴盐浓度为0.75 mol/l的条件下，绿原酸提取率可达到6.08%。

关键词：离子液体 酶 金银花 绿原酸

Optimization of ionic liquids based enzyme-assisted extraction of chlorogenic acid from Honeysuckle

Abstract

Chlorogenic acid (CGA) is an important secondary metabolite widely found in plants. It has antibacterial disinfection, reduce blood lipids in vivo concentration, anti-oxidation, anti-aging, enhance human resistance and other biological activity.The effective extraction of chlorogenic acid is of great significance to its application in food, health and other fields .In this experiment, the chlorogenic acid in honeysuckle was extracted by ionic liquid-enzymatic method. Through the screening of enzyme type and ionic liquid type, the single factor experiment was used to optimize the process parameters,and then the concentration of the extracted product was determined by UV-Vis spectrophotometry. The results showed that the extraction time was 40 min, the extraction solvent was pH 4.0, the concentration of pectinase was 1 mg / ml, the concentration of 1 - hexyl - 3 - methylimidazolium bromide was 0.75 mol / L, the extraction rate of chlorogenic acid could reach 6.08%.

Key words: ionic liquid; enzyme; honeysuckle; chlorogenic acid

目录

摘 要 I

Abstract II

第一章 文献综述 1

1.1 绿原酸的简介 1

1.1.1 绿原酸的理化性质 1

1.1.2 绿原酸的分布 1

1.2 绿原酸的提取方法 2

1.2.1 水提法 2

1.2.2 醇提法 2

1.2.3 生物酶解法 2

1.2.4 离子液体-酶法 3

1.3 绿原酸的分析测定方法 4

1.3.1 紫外分光光度法 4

1.3.2高效液相色谱法 4

1.4 绿原酸的分离纯化方法 5

1.3.1 大孔树脂法 5

1.3.2 超滤膜分离法 5

1.5 本论文研究内容 5

第二章 实验器材与方法 7

2.1 实验材料与仪器 7

2.1.1 材料 7

2.1.2 实验器材 7

2.2 实验方法 8

2.2.1 酶的筛选 8

2.2.2 离子液体的筛选 8

2.2.3 单因素试验法 8

第三章 结果与讨论

3.1 标准曲线的绘制 9

3.2 酶类型的选择 10

3.3 离子液体的选择 10

3.4 单因素试验 12

3.4.1 提取时间的影响 12

3.4.2 提取温度的影响 13

3.4.3 提取溶剂pH的影响 13

3.4.4 酶浓度的影响 13

3.4.5 离子液体浓度的影响 13

3.5 与其他提取方法的比较 15

第四章 结论与展望 16

4.1 结论 16

4.2 展望 16

参考文献 17

致 谢 20

第一章 文献综述

1.1绿原酸的简介

1.1.1 绿原酸的理化性质

绿原酸（Chlorogenic acid, CHA），又称3-咖啡酰奎宁酸，是一种多酚类化合物，主要来源于植物体的有氧呼吸。绿原酸所具有的抗氧化、排出体内毒素、保护心血管、降低体内血脂血糖浓度、增强人体抵抗能力等药理活性使之成为生物活性物质研究领域的热点之一^[1-3]。绿原酸分子式为C₁₆H₁₈O₉，为淡黄色的固体，熔点为208 ℃，密度为1.65g/cm³，在25 ℃水中溶解度只有4%，但随着水温逐渐升高，溶解也更充分，易溶于醇类有机溶剂如甲醇、乙醇等。因其结构容易改变，所以在提取的时候不可以温度过高和加热时间过长^[4-5]。

绿原酸的结构式

1.1.2绿原酸的分布

作为一种重要的活性成分，绿原酸在很多植物以及蔬菜水果中均有分布，其中普遍存在于忍冬科植物中^[6]。绿原酸的分布如下表1所示：

表1 含绿原酸的植物的分布及其含量（%）

1.2绿原酸的提取方法

1.2.1水提法

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