摘 要

目的：开发并验证一种快速、灵敏、准确的LC-MS/MS法测定β-榄香酮酸（β-elemonic acid）在大鼠血浆中的的含量，研究β-榄香酮酸在大鼠体内的药代动力学。方法：采用LC-MS/MS法，以花生四烯酸衍生物（AA-d8）作为同位素内标，进行检测方法的特异性、定量下限、标准曲线、精密度和准确度以及稳定性在内的方法学考察。用该方法获得大鼠经尾静脉注射和灌胃给药后的血浆中β-榄香酮酸浓度，并计算药动学参数。结果：β-榄香酮酸标准血浆样品质量浓度在5~1000ng·mL^-1范围内显示良好线性，满足精确度和准确度要求，提取回收率高，基质效应在可以接受的范围内，且样品稳定，未见明显降解，口服生物利用度为24.6%。结论：本实验建立了一种测定大鼠血浆中β-榄香酮酸浓度的LC-MS/MS法，该方法可成功应用于β-榄香酮酸在大鼠体内药代动力学研究。

关键词：β-榄香酮酸 乳香 三萜类化合物 LC-MS/MS 药代动力学

Research on Pharmacokinetics of β-elemenone in Rats

Abstract

OBJECTIVE: To develop and validate a rapid, sensitive and accurate LC-MS/MS method for the determination of β-elemonic acid in rat plasma, and to study the pharmacokinetics of β-elemonic acid in rats. METHODS: LC-MS/MS method was used, and arachidonic acid derivative (AA-d8) was used as the internal standard of isotope. The specificity, lower limit of quantification, standard curve, precision, accuracy and stability of the method were investigated. The plasma concentration of β-elemonic acid in rats after tail vein injection and intragastric administration was obtained by this method, and the pharmacokinetic parameters were calculated. RESULTS:The standard plasma concentration of β-lemmonic acid showed good linearity in the range of 5~1000ng·mL^-1, which satisfied the accuracy and accuracy, the extraction recovery rate was high, the matrix effect is within an acceptable range, and the sample is stable with no significant degradation, oral bioavailability was 24.6%. CONCLUSION:This experiment established an LC-MS/MS method for the determination of β-lemmonic acid in rat plasma, this method can be successfully applied to the pharmacokinetic study of β-elemenone in rats.

Key Words: β-elemonic acid;frankincense;triterpenoids;LC-MS/MS;pharmacokinetics

目录

摘 要 I

Abstract II

第一章 文献综述 1

1.1三萜类化合物的研究现状 1

1.1.1乳香的抗炎作用 2

1.1.2乳香的降糖作用 2

1.1.3乳香的抗溃疡作用 3

1.1.4乳香的抗肿瘤细胞增殖作用 3

1.1.5乳香的诱导分化凋亡作用 3

1.2三萜类化合物常用的分析方法 4

1.3三萜类化合物药代动力学研究 5

第二章 β-榄香酮酸在大鼠血浆中的分析方法学考证 6

2.1实验材料 6

2.1.2实验试剂 6

2.2实验方法 7

2.2.1 色谱条件 7

2.2.2 质谱条件 7

2.3标准溶液和质量控制（QC）样本的制备 8

2.3.1储备液和工作液配制 8

2.3.2标准溶液和质量控制（QC）样本的制备 8

2.4血浆样品的预处理 8

2.5实验方法学考察 8

2.5.1专属性的考察 8

2.5.2标准曲线线性和定量下限考察 9

2.5.3精密度与准确度的考察 9

2.5.4提取回收率的考察 9

2.5.5基质效应的考察 9

2.5.6样品稳定性的考察 10

2.6实验结果与讨论 10

2.6.1检测方法优化过程 10

2.6.2专属性考察实验结果 12

2.6.3标准曲线线性和定量下限考察实验结果 13

2.6.4精密度与准确度考察实验结果 14

2.6.5提取回收率考察实验结果 15

2.6.6基质效应考察实验结果 15

2.6.7样品稳定性考察实验结果 16

2.7实验结论 16

第三章 β-榄香酮酸在大鼠体内的药代动力学研究 17

3.1实验方法 17

3.1.1实验动物 17

3.1.2给药与采样 17

3.1.3血浆中β-榄香酮酸质量浓度的测定 17

3.2实验结果与讨论 18

3.3实验结论 19

第四章 总结与展望 20

参考文献 21

致 谢 25

第一章 文献综述

β-榄香酮酸(β-elemonic acid)，是橄榄科植物乳香树或同属植物的胶状树脂乳香中的活性成分之一[1]。乳香（frankincense）是一种含有挥发油的香味树脂，主要成分为树脂、树胶、挥发油等，主要由分布在红海沿岸的一些地区的橄榄科卡氏乳香树产出[2]。

乳香在我国的药用历史悠久，最早在《名医别录》中便有记录，被列为上品。乳香因为其有活血行气、养血调经、解毒止痛、追毒等独特的功效，主治气血凝滞、跌打损伤、风湿以及类风湿性关节炎等症状[3]。现代药理研究表明，乳香有镇痛、抗炎、降糖、抗氧化、抗溃疡、改善记忆等诸多药理活性，具有潜在的开发应用前景[3]。

β-榄香酮酸(β-elemonic acid)为白色絮状晶体，图1-1所示结构为β-榄香酮酸的结构式，其在氯仿和甲醇中的溶解度较好。