线粒体靶向抗氧化剂MitoQ的体外细胞摄取实验研究文献综述
2020-05-01 08:39:17
文 献 综 述 1、 LC-MS/MS在生物样品检测应用概述 (LC-MS/MS)是在液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)的 基础上发展起来的,先对目标化合物进行色谱分离而后对分离组分质谱碎片离子进行多级质量分析的色谱-质谱联用技术。
由于生物样品基质成分复杂、待测物浓度低、浓度差异大,而且待测样品数量较大,因此建立高效准确、高通量的分析方法成为生物样品检测的关键。
LC-MS自上世纪70年代问世以来,经过持续而快速的发展与使用,已经日趋成熟[1]。
它将液相色谱的高分离能力与质谱的高灵敏度和高专属性结合为一体,其灵敏度比液相色谱紫外检测平均高1-2个数量级,可用于不挥发性化合物、极性化合物、热不稳定化合物和大分子量化合物(蛋白质、多肽、多糖和多聚物等)的分析。
LC-MS结合串联质谱技术(tandem mass spectrometry,MS/MS)将 3 个四极质量分析器串联,即串联三重四极质谱(triple stage quadrupole,TSQ),构成LC-MS/MS技术。
三重四极杆串联质谱属于空间上的串联质谱,具有强大的定量功能。
LC-MS/MS 也从根本上解决色谱流出物的定性问题,可获得复杂基质中单一成分的质谱图,有利于药物、药物代谢物和内源性化合物的分离与鉴定。
在串联质谱上采用特异反应监测(SRM)和多重反应监测(MRM)后,显著地降低了背景所产生的干扰信号,具有较高的灵敏度和较强的专属性,不需要使分析物之间实现完全的色谱分离,使得样品预处理过程简化,分析测试时间大为缩短。
同时LC-MS/MS具有多通道检测功能,允许同时对多个成分进行定性、定量分析,真正实现了生物样品中药物的高通量分析。
随着现代色谱质谱联用技术的发展,生物样品内多种微量代谢产物的分离、鉴定已成为一个连续过程,并且能实现物质检测的高灵敏度高选择性,这就为在复杂的生物基质中定性、定量分析痕量药物及其代谢物提供了可能[2-5]。
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