1. 研究目的与意义（文献综述）

银杏（ginkgo biloba）又名白果公孙树、鸭脚子、鸭掌树，为最古老的中生代孑遗植物之一，现仅存一科一属一种，故有裸子植物活化石之称，我国的银杏大致分布极广，除黑龙江除吉林、内蒙古、青海、西藏外，其它各省区均有分布。我国是银杏的故乡，现有资源占世界银杏资源70%以上。

银杏的药用主要体现在医药、农药和兽药三个方面。明代李时珍曾曰：“入肺经、益脾气、定喘咳、缩小便。”清代张璐璐的《本经逢源》中载白果有降痰、清毒、杀虫之功能，可治疗“疮疥疽瘤、乳痈溃烂、牙齿虫龋、小儿腹泻、赤白带下、慢性淋浊、遗精遗尿等症”。明代江苏、四川等地曾出现了用白果炮制的中成药，用于临床。

目前对于银杏果的研究开发有很好的前景，特别是以白果为主料，经科学配方精制而成的银杏果各类食品，集可口性、营养性和保健性于一体，具有广阔的开发前景。在我国以银杏为主要原料的系列食用保健品的制备方法和加工工艺已获得10多项国家专利，专利号分别为银杏果茶(93111590.6)、银杏保键茶(93111621.x； 93100852.2) 、银杏汁(93111583.3) 、银杏口服液 (93118703.6)、银杏保健饮料(93111581.7)、银杏啤酒 (93115245.3) 、银杏果晶(93111578.7) 、银杏露 (93111579.5)、银杏王(931111582.5)等。

2. 研究的基本内容与方案

白果活性成分提取检测试验方案

以银杏蒂为原料进行正交试验，选择最优方案。称取银杏蒂粉末3g，用无水乙醇提取有效成分，方案如下：

正交试验安排：

有效成分检测：

检测方法采用《药典》方法检测：

总黄酮酸苷测定：照高效液相色谱法（附录ⅥD）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.4％磷酸溶液（50:50）为流动相；检测波长为360nm。理论板数按懈皮素峰计算应不低于2500。对照品溶液的制备分别精密称取槲皮素对照品、山奈素对照品、异鼠李素对照品，加甲醇制成每1ml分别含30μg、30μg、20μg的混合溶液，作为对照品溶液；或精密称取已标示槲皮素、山柰素、异鼠李素含量的银杏叶对照提取物35mg，照供试品溶液的制备方法，同法制成对照提取物溶液。供试品溶液的制备：取本品约35mg，精密称定，加甲醇-25％盐酸溶液（4:1）的混合溶液25ml，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却至室温，转移至50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液（或对照提取物溶液）与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定，分别计算槲皮素、山柰素和异鼠李素的含量，按下式换算成总黄酮醇苷的含量。总黄酮醇苷含量=（槲皮素含量 山柰素含量 异鼠李素含量）× 2.51本品按干燥品计，含总黄酮醇苷不得少于24.0％。

萜类内酯测定：照高效液相色谱法（附录Ⅵ D）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以正丙醇-四氢呋喃-水（1:15:84）为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论板数按白果内酯峰计算应不低于2500。对照品溶液的制备。分别精密称取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品和银杏内酯C对照品适量，加甲醇制成每1ml各含2mg、1mg、1mg、1mg的混合溶液，作为对照品溶液。或精密称取已标示白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C含量的银杏叶对照提取物0.15g，照供试品溶液的制备方法，同法制成对照提取物溶液。供试品溶液的制备 取本品约0.15g，精密称定，加水10ml，置水浴中温热使溶散，加2％盐酸溶液2滴，用乙酸乙酯振摇提取4次（15ml，10ml，10ml，10ml），合并提取液，用5％醋酸钠溶液20ml洗涤，分取醋酸钠液，再用乙酸乙酯10ml洗涤。合并乙酸乙酯提取液及洗液，用水洗涤2次，每次20ml，分取水液，用乙酸乙酯10ml洗涤，合并乙酸乙酯液，回收溶剂至干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液（或对照提取物溶液）5μl、10μl，供试品溶液5-10μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程分别计算白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的含量，即得。本品按干燥品计算，含萜类内酯以白果内酯（C15H18O8）、银杏内酯A（C20H24O9）、银杏内酯B（C20N24O10）和银杏内酯C（C20H24O11）的总量计，不得少于6.0％。

银杏酸测定：色谱柱:HypersilODS(4.0 mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-0. 1%磷酸水溶液(90：10);DAD检测器检测波长310 nm;流速为1.0 ml/min。对照品溶液的制备：分别精密称取银杏酸-Ⅰ、银杏酸-Ⅱ、银杏酸-Ⅲ对照品,各加甲醇制成每1 ml分别含0.1mg、0.5 mg、0.2 mg的溶液,作为对照品溶液。样品溶液的制备：取3ml提取液，浓缩近干，加20 ml水溶解并转移至分液漏斗中,用氯仿萃取3次,每次20 ml,合并氯仿液,蒸干,用2 ml甲醇溶解,用0.45μm微孔滤膜过滤,即得。

a.正交试验数据分析，选取最优提取方案

b.白果活性成分提取检测

称取白果粉末5g，用无水乙醇提取，选取正交试验所得最优方案提取，提取物进行色谱测定。

c.外壳活性成分测定

称取外壳粉末5g，用无水乙醇提取，选取正交试验所得最优方案提取，提取物进行色谱测定。

3. 研究计划与安排

时间安排：

第1周：综述

第2周：开题报告

4. 参考文献（12篇以上）

1.白果蛋白的提取分离、结构表征及酶解制备多肽的研究，中国林业科学研究院，王成章，2010.07

2. 白果黄酮的提取工艺研究，辽宁大学学报，孟凡瑞，刘 宇，10005846( 2014)04036905，2014.04

3. 白果活性成分的提取及其功效研究进展，仲恺农业工程学院学报，赵春芳,朱立学， 1674- 5663(2009)04- 0067- 04，2009.07