酯类凝胶的合成及应用开题报告
2020-04-15 17:09:33
1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)
文 献 综 述
脂肪酶,又称三酰基甘油酰基水解酶,广泛存在于动植物和微生物体内。[1] 脂肪酶是重要的工业酶制剂品种之一,可以催化解脂、酯交换、酯合成等反应,广泛应用于油脂加工、食品、医药、日化等工业。[2]脂肪酶是最早研究的酶类之一。由于微生物脂肪酶种类多,作用温度及ph范围比动植物脂肪酶广、底物专一性高,并且便于工业生产和获得较高纯度的酶制剂,因此微生物脂肪酶已成为工业生产脂肪酶的主要来源,关于脂肪酶在工业上的应用研究也越来越多。[3-5]
目前脂肪酶活性测定方法主要有平板法、滴定法和比色法,其中比色法又包括铜皂法、微乳液法和对硝基苯酚法。[6]平板法所使用的仪器十分常见、所使用的试剂也比较便宜,但该种方法的误差较大同时需要的时间很长,因此该种方法主要应用于产脂肪酶菌种的筛选及批量酶样品的快速测定;滴定法所使用的仪器常见、操作简单,所使用的试剂比较便宜,精确度较高,适合于学生实验和具备简单仪器的实验室测定脂肪酶的活性;铜皂法所使用的仪器较常见、操作繁琐、稳定性不高,但实验精确度高且试剂较便宜,大部分实验室和生物技术公司用该种方法测定脂肪酶的活性;微乳液法所使用的仪器常见、操作简单,重复性好,但试剂价格偏高,主要适用于实验室和生物技术公司对酶活性的精确测定;而用硝基苯酚法,实验试剂价格昂贵且有毒,主要适用于实验室对酶活性的测定。[7]鉴于目前的检测手段的局限性,所以一种简单、方便和灵敏的检测脂肪酶活性的方法急需建立。
2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
控制PEG/PCL的比例和实验温度,在适当条件下合成PCL-PEG-PCL凝胶,将凝胶缠绕在纳米金周围形成保护层,通过脂肪酶的水解,将保护层水解掉,释放出纳米金,在高盐浓度下纳米金聚集变蓝,从而达到我们可视化检测脂肪酶活性的目的。
同时探究温度、pH、时间、脂肪酶的量等对脂肪酶活性的影响,并确定检测脂肪酶活性的最适条件,确定线性范围,并进一步探讨脂肪酶水解的反应机理。