谷氨酸棒状杆菌中accD1的克隆与整合文献综述
2020-05-24 12:16:26
文 献 综 述 脂肪酸作为一种重要的平台化合物,可进一步合成高能比生物燃料,高附加值油脂化学品(ω-3多不饱和脂肪酸、聚羟基脂肪酸酯、脂肪醇等),因此在医药、食品、化工等诸多领域具有广泛的应用前景[1,2,3]。
但是,就目前来看,工业化脂肪酸主要由化学合成法制备,存在反应步骤繁琐,条件苛刻,目标产物选择性差等不利条件,不适于作为前体物质进一步合成下游产物等诸多缺点[2]。
而生物基游离脂肪酸的合成条件温和、目标产物选择性强,可通过对目标菌株的代谢重构及发酵调控来获得不同碳链长度、支链位置以及饱和度的游离脂肪酸及其衍生物(作为替代植物油的化工原料),有利于作为前体物质进一步合成各种不同的下游化学品,生物法合成脂肪酸逐渐成为当今基础性平台化合物的研究热点[4]。
目前,生物法合成脂肪酸的研究主要集中在大肠杆菌,但其生产能力仍然很低,且分离纯化出的脂肪酸可能含有热源性物质脂多糖,不利于医药食品的应用[5]。
谷氨酸棒状杆菌作为典型的革兰氏阳性菌,细胞壁不含脂多糖,有利于脂肪酸的分离纯化;其次,胞内不存在脂肪酸降解的β氧化途径,从而有利于脂肪酸的积累[6,7]。
1. 大肠杆菌脂肪代谢途径 生物法合成脂肪酸包括3个过程:1)从葡萄糖出发,经糖酵解作用和三羧酸循环,为脂肪酸的合成提供底物乙酰CoA;2)苹果酸酶催化苹果酸脱羧生成丙酮酸,并释放NADPH,是脂肪酸合成的主要动力;3)经脂肪酸从头合成,乙酰CoA在脂肪酸合成酶系(FAS)的催化下转化生成酯酰CoA,酯酰CoA在硫酯酶TesA的水解作用下,释放出游离脂肪酸[8,5]。
2. 谷氨酸棒杆菌合成脂肪酸的优势 目前大肠杆菌定向调控合成脂肪酸虽然已取得一定的研究进展,但产量及收率仍未达到工业化水平[9,10,11]。
大肠杆菌是革兰氏阴性菌,分离纯化出的脂肪酸可能含有热源性物质脂多糖(内毒素),会造成免疫原性反应,不利于在食品医药中的应用。
谷氨酸棒状杆菌作为典型的革兰氏阳性菌,细胞壁不含脂多糖,有利于产物游离脂肪酸的分离纯化,且其胞内不存在降解脂肪酸的β氧化途径,更有利于游离脂肪酸的合成与积累。
谷氨酸棒状杆菌具有底物范围广、遗传背景清楚、易于工程调控、可高密度发酵等特点,已经成为微生物催化合成化学品和燃料的理想受体菌。