文 献 综 述

一、硼替佐米简介与主要合成路线

硼替佐米，化学名称：[（1R）-3-甲基-1-[[（2S）-1-氧-3-苯基-2-[（吡嗪羧基）氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸，商品名：万珂，剂型为注射剂，是全球首个人工合成的蛋白酶抑制剂，本品可联合美法仑和泼尼松（MP方案）用于既往未经治疗的且不适合大剂量化疗和骨髓移植的多发性骨髓瘤患者的治疗；或单药用于至少接受过一种或一种以上治疗后复发的多发性骨髓瘤患者的治疗。由于硼替佐米在抗肿瘤方面有效的药理作用，使得该药也逐渐成为重要的抗肿瘤药物。

硼替佐米[1]的合成路线主要包含以下两条，1，含氨基保护基德L-苯丙氨酸先同喊硼基保护剂的甲基丁烷硼酸盐反应，脱去氨基保护基后同吡嗪酸反应，生成含硼基保护基的硼替佐米的前体4，化合物4再同异丁基硼酸反应脱去硼基保护基团后，[2]再经碱、酸处理及有机溶剂萃取、固化得到硼替佐米。2，吡嗪酸同L-苯丙氨酸反应生成2，化合物2同含硼基保护基的甲基丁烷硼酸盐反应生成4，化合物4重复上述过程得到硼替佐米。

二、溶媒残留与测定方法

残留溶剂[3]系指在原料药、辅料以及制剂生产中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机挥发性化合物。这些有机溶剂由于服用后对人体有毒性和致癌作用，虽然微量但是足以引起很多重视。根据中国药典及国际协调会议（ICH）中对于药品中残留溶剂的含量及限度进行明确的规定。在药品合成、精制等过程中涉及的有机溶剂可高达几百种，而每种有机溶剂对于人体的危害性又各不相同。因此，根据中国药典附录中对于残留溶剂进行了分类与限制。

在硼替佐米合成工艺路线中使用了有机溶剂：二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯、甲醇、正己烷等，都应对其进行残留溶剂的限度检查，并通过相关方法的选择与筛选进行溶媒残留的测定。

根据中国药典[4]有关规定，二氯甲烷、甲醇、正己烷属于第二类溶剂，限度分别为0.06%、0.3%、0.029%，丙酮、乙酸乙酯属于第三类溶剂，限度为0.5%。为了保证硼替佐米原料药的质量，需要对其溶媒残留进行测定，并加以控制。

气相色谱法是中国药典对有机残留溶剂测定的法定检测方法,也是检测有机溶剂的最常用、最适用的方法之一。测定残留溶剂的气相色谱法主要有三种，第一，毛细管顶空进样等温法；第二，毛细管柱顶空进样系统程序升温法；第三，溶液直接进样法。

顶空进样法[5]与直接进样相比[6]可以避免挥发性物质污染检测系统，同时能满足ICH 规定的大多数残留溶剂的检测要求，在药物残留溶剂检测中应用广泛。直接进样适用于受热不易分解的物质，使样品溶解在适当溶剂后，抽取一定量样品溶液直接进样；色谱柱多采用填充柱或大口径毛细管柱[7]。这种进样方式简洁方便，但易污染进样口和色谱柱。当进样量小时，则检测灵敏度低；增大进样量则对色谱系统污染更加严重，当污染到检测系统，则使基底升高，噪音增大，影响检测灵敏度。当水为溶剂时，还易使色谱柱固定相流失，缩短使用寿命。当以其他有机溶剂溶解样品时，则产生较大溶剂峰，使分析时间延长，而且往往分解产物和溶剂峰干扰测定，一般利用程序升温[8]方法，使溶剂尽快除去。

通过色谱柱的选择并进行系统适用性实验，然后筛选出适宜的残留溶剂测定[9][10]方法。

三、测定方法的建立

3.1溶解介质的确定

根据残留溶剂和药物的性质，与各组分极性的差异，选择合适的溶解介质。

3.2色谱柱的筛选

待测样品在分析过程中经汽化后进入色谱柱，由于非典极性以及吸附等物理化学性质的 不同，各组分在固定液与流动相之间吸附、解吸速率不同，经过反复吸附解吸，最终实现完全分离。由于固定液的极性对于待测组分的出峰时间、峰形对称度和理论塔板数等色谱参数有影响，这些参数对于各组分的准确定量具有重要意义。所以，在实验中，需要对样不同极性固定液的色谱柱进行筛选，综合各组分的性质，选择适宜的色谱柱。

3.3进样方式的选择

溶剂残留较多使用顶空进样的[8]方式来测定，由于待测样品在高温条件下可能分解出挥发性产物干扰某些溶剂的测定，故选择顶空进样方式完成溶剂残留的测定。

3.4 分析方法的建立

3.4.1色谱条件的确定

在选定色谱柱后，选用合适的柱温[11]，色谱柱洗脱的流速，升温速率等，使得各组分的保留时间，峰面积等能够很好的分离，便于最终实验结果的显示。

3.4.2 流动相的选择与比例的分布

选用合适的流动相与洗脱方法。

四、测定方法的验证

对于不同批次硼替佐米样品的残留溶剂[9][10]测定，相关的方法学验证，系统适用性、专属性、精密度、重现性、中间精密度、线性、检测限、定量限、耐用性等。

4.1系统适用性

分离度、柱效、重复性和拖尾因子其中分离度和柱效是两个最重要、也更具有实用意义的参数。分离度[12]是判断两物质在一个方法中分离的程度，虽然与柱效相关，但在衡量系统适用性时，首先强调的应该是分离度，只有当色谱图中仅有一个色谱峰或测定微量成分时，规定柱效才有其特殊重要性。重复性和拖尾因子分别对重现性和色谱峰的峰形做出了要求。重现性保证了方法的可重复性，对柱效能提出了要求，柱子老化、塌陷，拖尾因子则难以达到要求。

4.2 线性

精密称取供试品，制成溶液浓度不同的标准溶液[13]，按上述色谱条件与方法进行含量测定，以峰面积为横坐标，以溶液浓度为纵坐标进行线性回归，作出线性回归方程。在一定浓度范围内，色谱峰面积与浓度呈现良好的线性关系。

4.3 检测限与定量限

根据线性关系[14]，检测出硼替佐米样品中残留溶剂的色谱峰面积，得出检测限与定量限。依据检测限与定量限[15]，换算出各残留溶剂在样品中的含量与检出限度[16]。

根据样品中残留溶剂的检出限度，将其与中国药典与ICH 对于残留溶剂限度的相关规定，确证不同批次的硼替佐米样品中残留溶剂是否符合限度要求[17]。以此分析方法对不同批次的硼替佐米原料药的溶媒残留进行测定[18]，为该品种的质量研究提供准确、有效的数据。

参考文献

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