摘 要

沙参麦冬汤源于清代名医吴鞠通的《温病条辨》，由北沙参、麦冬、玉竹、天花粉、扁豆、桑叶、生甘草七味中药组成，具有清养肺胃、生津润燥的功效。沙参麦冬颗粒（以下简称沙麦颗粒）在此经典名方的基础上，对方中七味药做出科学合理的调整，加入适量糊精和阿司帕坦，以90%乙醇制软材制粒而成，是治疗肺阴亏耗类亚急性、慢性咳嗽的现代制剂。

沙参麦冬复方临床应用历史悠久，疗效确切，国内外学者对该方进行了深入的研究。武素等学者研究了它清肺润燥和化痰止咳，清肺、养阴、宣肺、扶正等功效^[1]；马晓群等学者发现了它降低体内胆固醇含量，抑制体内衰老蛋白，增加凋亡基因的表达等机制^[2]；郭光爱等学者发掘出沙参麦冬汤治疗中晚期非小细胞癌，滋阴养胃、健脾消胀，具有治疗功能性消化不良的功能^[3]。当前，国内外学者们研究集中于沙参麦冬复方的药效及药理学，对其化学物质基础的研究并不多，沙参麦冬复方活性成分尚不明确，因此对其化学物质基础及其活性成分的研究具有一定现实意义。在沙参麦冬颗粒乙酸乙酯部位中，含有许多黄酮类物质，具有丰富的药用活性价值。本课题主要利用硅胶柱层析技术、TLC技术、半制备液相等技术，来研究沙参麦冬颗粒乙酸乙酯部位的化学成分，以期得到预期的单体化合物，为研究沙参麦冬的疗效及作用机制奠定基础。

关键词：沙参麦冬颗粒；硅胶柱层析；薄层色谱；高效液相色谱；半制备液相

Abstract

Shashen Maidong Tang was originally derived from the famous doctor of the Qing Dynasty, Wu Yitong's "Warm Diseases", consisting of seven kinds of traditional Chinese medicines: Beishashen, Ophiopogon japonicus, Polygonatum, Trichosanthin, Lentil, Mulberry, and Raw Licorice. The effect of stomach, Shengjin Runzao. On the basis of this classic name, SSMD Granule makes a scientific and reasonable adjustment of the other seven kinds of medicines, adding appropriate amount of dextrin and aspartame, and granulating with soft material made of 90% ethanol. It is a modern preparation for the treatment of subacute and chronic cough with lung yin deficiency.

Shashen Maidong compound has carried out more in-depth research on the drug because of its nourishment of lung and stomach, and the effect of detoxification. Clinically, Wu Su and other scholars have affirmed the effects of Qingfei Runzao and Huayu Zhike, Qingfei, Yangyin, Xuanfei and Fuzheng. In pharmacological research, Ma Xiaoqun and other scholars have found that it reduces cholesterol in the body and inhibits aging in the body. Protein, increasing the expression of apoptotic genes; pharmacological effects, scholars have discovered that Shashen Maidong Decoction for the treatment of advanced non-small cell carcinoma, nourishing yin and nourishing the stomach, spleen and swelling, has the function of treating functional dyspepsia. At present, scholars at home and abroad have studied the therapeutic effects of Radix Salviae Miltii compound, and there are not many studies on its chemical substance basis and its compatibility mechanism. Therefore, the active ingredients of Radix Salviae Miltii compound are not clear. In the ethyl acetate part of Radix Scutellariae Radix, it contains many flavonoids and has rich biological activity value.

At present, domestic and foreign studies mainly focus on the effect of Shashen Maidong compound on chronic cough, but scholars do not study the chemical substance basis and its compatibility mechanism. Therefore, the active ingredients of Radix Salviae Miltii compound unclear. The use of modern scientific and technological methods to study the chemical substance basis of Shashen Maidong compound compatibility is not only important for clarifying its compound compatibility theory, but also for promoting Chinese medicine prescriptions to the international community, and it may be combined with national conditions and exerting traditional medicine and resource advantages. An important and effective way to conduct innovative drug research. In the ethyl acetate part of Radix Scutellariae Radix, it contains many flavonoids and has rich biological activity value. This project mainly uses silica gel column chromatography, TLC technology and semi-preparative liquid phase technology to separate the chemical constituents of the ethyl acetate part of Radix Salviae Miltiorrhizae granules, and obtain the expected monomeric compounds, in order to study the efficacy and effect of Radix Salvia The mechanism lays the foundation.

Key words：SSMD Granule，Silica gel column chromatography，TLC，HPLC，Semi-prepara

目录

第一章 沙参麦冬研究概况 1

1.1 沙麦颗粒的化学成分研究概况 1

1.1.1 北沙参 1

1.1.2 麦冬 1

1.1.3 玉竹 1

1.1.4 天花粉 1

1.1.5 白扁豆 2

1.1.6 甘草 2

1.1.7 桑叶 2

1.2 沙麦颗粒的药理研究概况 2

1.2.1 北沙参 2

1.2.2 麦冬 3

1.2.3 玉竹 3

1.2.4 天花粉 3

1.2.5 白扁豆 4

1.2.6 甘草 4

1.2.7 桑叶 5

1.3 沙麦颗粒临床应用概况 5

第二章 沙参麦冬颗粒乙酸乙酯部位的化学成分研究 7

2.1 实验试剂及材料 7

2.2 实验过程 8

2.2.1 制备沙麦颗粒乙酸乙酯部位 8

2.2.2 预实验 8

2.2.3 沙麦颗粒乙酸乙酯部位的分离 9

2.2.4 化合物结构鉴定 11

2.3 流程图 12

第三章 结果分析 13

3.1 实验结果 13

3.1.1 沙麦颗粒乙酸乙酯部位的制备结果 13

3.1.2 预实验结果 13

3.1.3 层析柱洗脱条件结果 13

3.1.4装柱结果 14

3.1.5 半制备分离结果 14

3.1.6 化合物鉴定结果 14

参考文献 16

附录 18

致谢 22

1. 沙参麦冬研究概况

1.1 沙麦颗粒的化学成分研究概况

1.1.1 北沙参

北沙参（Glehnia lit－toralis F.Schmidt ex Miq.）为伞形目伞形科植物，整株有毛，以根部入药。北沙参味道甘甜，主治肺燥咳嗽、热病伤津，是临床上常用的滋阴养肺药。近年研究表明，北沙参的化学成分主要包括香豆素类（如欧前胡酯、异欧前胡酯、别异欧前胡内素）、挥发油（醛类、醇类、萜类成分，主要为反，反-2，5-癸二烯醛）、聚炔类（人参二炔醇、法卡林醇）、酚酸类（香草酸、水杨酸、阿魏酸、没食子酸、香豆酸）等成分^[4]。

1.1.2 麦冬

麦冬（Ophiopogon japonicus (Linn. f.) Ker-Gawl.）为多年生常绿草本植物，末端根部粗大，中间或近末端常膨大形成椭圆形状小块根，此部位可入药，有生津止咳、养阴润肺之效。近年来，学者已对麦冬的化学成分及其活性物质作了许多研究，发现了甾体皂苷（以胆甾醇苷为主）、高异黄酮以及非甾体皂苷类化合物（以苯丙醇苷、龙脑苷为主）^[5]。

1.1.3 玉竹

玉竹（Polygonatum odoratum （Mill.）Druce）为百合科多年生草本植物，叶面显绿色，肉质呈黄白色，须根生长密集，根茎横向生长，可供药用，主治肺燥干咳、热病口渴。玉竹中化学成分主要包括甾体皂苷类（螺甾烷醇类甾体皂苷和呋甾烷醇类甾体皂苷）、高异黄酮类（5，6－二羟基－8－甲氧基－3－ ( 3’－羟基－5’－甲氧基苄基)－色烷－4－酮等）、挥发油类（酸类化合物、烯酸类化合物、烯类、炔类、醇类、醛类等）及多糖类（果糖、甘露糖、半乳糖醛酸和葡萄糖，组成摩尔比为 6 ∶ 3 ∶ 1.5 ∶ 1）等化合物^[6]。

1.1.4 天花粉

天花粉为葫芦科植物栝蒌的根，是一种清热去燥的中药，其具体功效是养阴去热，生津解渴，缓解肿胀。主治干咳口渴、消渴、糖尿病，肺热，咯血、痈肿、伤津。临床上常用它与滋阴药配合使用，治疗糖尿病以达到标本兼治的作用。天花粉中主要含有蛋白质（即a、b、c三种天花粉蛋白异构体）、多糖（由鼠李糖、阿拉伯糖、蔗糖、果糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖）、皂苷（总皂苷和葫芦素Ｂ）、氨基酸（甘氨酸、β－氨基丁酸、天门冬氨酸和组氨酸）等成分^[7]。

1.1.5 白扁豆

白扁豆为豆科植物扁豆的干燥成熟种子，呈扁椭圆形或扁卵形，表面成浅黄白色或浅黄色, 平滑, 色泽圆润, 并且具有在一侧上的凸起的种子。表壳坚硬, 种皮处干脆而轻薄, 种瓣宽厚肥大, 剥开显黄白色, 闻之气味清淡, 嚼之有豆腥气。研究表明，白扁豆种子中含蛋白质2.27%（胃蛋白酶抑制剂、多糖酶抑制物、谷氨酸酶）、糖类（淀粉、水苏糖、果糖）、维生素及矿物质（维生素A、B、C，以及钙、磷、铁和植酸钙镁）等生物活性物质，有健脾去湿、利尿消肿、养肝明目等功效^[8]。

1.1.6 甘草

甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch），多年生草本植物，表皮显红棕色或灰棕色。根茎为圆柱形，表面有淡色芽痕，根和根状茎可供药用，有清热利咽、去痰止咳、滋阴润肺的功效。研究表明，甘草中主要含有三萜类化合物（以甘草酸和甘草次酸为主）、黄酮类化合物（甘草素，异甘草素，甘草苷等）、多糖类化合物（半乳糖，鼠李糖，阿拉伯糖和水苏糖）等有效成分^[9]。

1.1.7 桑叶

桑叶（Mulberry Leaf）是桑科植物桑的干燥叶，整个叶片是宽卵形的，叶片的底部是心形的，顶端呈尖钩形，边缘叶片有细密锯齿，叶脉长有密集的白色柔毛，老叶较厚显暗绿色。桑叶具有解渴，清肺，润燥，清肝，清眼的功效。并且有治疗风热感冒，肺热干咳，头晕和五感不适的作用。桑叶化学成分丰富，主要包括酚类及黄酮类（Diels-Alder型加合物，茋类化合物，黄茋苷）、生物碱类（1-DNJ）、多糖(MP11，MP12，MP13)和甾类化合物（β-谷甾醇，豆甾醇，菜油甾醇）等有效成分^[10]。

1.2 沙麦颗粒的药理研究概况

1.2.1 北沙参

北沙参性味温和，是药物中的阴和保湿药。对许多疾病有很好的治疗效果，并具有良好的药用价值和应用前景。北沙参药材的化学成分十分复杂，而不同的提取物的药理作用不同。免疫系统研究的结果表明，板蓝根南沙参提取物能增加小鼠胸腺和脾脏器官的质量，增强巨噬细胞的吞噬能力，消除嗜中性粒细胞显著促进脾B细胞在小鼠体内的发展。其他结果表明，北沙参对肺纤维化、肺炎均有较好的治疗效果，北沙参3种提取物对肺癌细胞株A519和肝癌细胞株HEAP在体外均有一定的抑制清除作用。

1.2.2 麦冬

麦冬的主要功能是滋养阴虚和健脾，用于治疗肺燥干咳、阴虚伤病、阴虚损伤，咽喉疼痛，内热和口渴，以及心烦和失眠。彭婉，王建等学者研究发现：

（1）麦冬水提物、多糖等通过影响核转录因子-κB（NF-κB）途径，它促进瘦素、脂联素蛋白的表达，并增加对胰岛素的敏感性，从而降低小鼠细胞或体外的血糖。

（2）麦冬的总皂苷或多糖等可通过影响游离脂肪酸、丙二醛或鞘氨醇5-磷酸、成纤维细胞生长因子、细胞外调节蛋白激酶和外皮一氧化氮合酶的活性来保护心血管系统。

（3）麦冬总皂苷可以在一定程度上消除体内的羟自由基，调节巨噬细胞的吞噬能力。用麦冬提取物对大鼠进行长期负荷训练可以提高其免疫功能，抑制过氧化损伤和糖原的衰竭。

（4）麦冬总皂苷及各部位提取物对炎症有良好的治疗作用，特别是对放射性肺炎的预防和治疗，可以不同程度地抑制或减少肺泡的炎症反应，从而有效地保护肺部组织^[11]。

1.2.3 玉竹

现代药理学研究表明玉竹具有降血糖、免疫调节、抗氧化、抗衰老及抗肿瘤等药理作用。李妙然，魏颖等研究发现：

（1）玉竹总皂苷对四氧嘧啶高糖小鼠具有降血糖作用，其降血糖机制与α-葡萄糖苷酶活性的抑制明显相关，显著降低四氧嘧啶对糖尿病大鼠胰腺B细胞的损伤，对胰岛B细胞有一定的保护促进作用，从而降低血糖。

（2）玉竹通过增加环磷酰胺的含量，来增强小鼠的免疫能力，通过改善脾脏器官的质量，吞噬细胞中粒细胞的百分比、粒细胞指数，来促进溶血素和溶血斑的形成，改善并提高淋巴细胞免疫能力和转化效率发挥作用。

（3）玉竹提取物B 可促进小白鼠脾脏细胞分泌IL-2和腹腔中吞噬细胞分泌IL-1和TNF-α，从而抑制或阻断肿瘤CL187的增殖，或可直接诱导肿瘤细胞凋亡基因表达，以此来清除肿瘤细胞，达到抗癌作用。

（4）玉竹水提物对大鼠血栓的形成有明显的抑制作用，其作用机制可能与降低血浆中血栓烷B2的含量和增加血浆中 6－酮－前列腺素 FLα的含量有关。

1.2.4 天花粉

天花粉气味甘甜，嚼之微苦，属寒性；功效为清热生津、养阴去热，生津解渴，排脓消肿，主要用于治疗热病口渴、消渴多饮、干咳口渴、肺热咳血、痈肿、伤津等。

天花粉的药理研究表明：天花粉蛋白对免疫系统功能表现出增强和抑制两方面作用。一方面天花粉对小鼠脾脏的白髓成分有明显的增殖作用，IgMB淋巴细胞和IgM浆细胞的转化率增加，数量明显增加。同时，巨噬细胞区域明显增大，免疫细胞的形成和分化也显著增加。另一方面，天花粉蛋白也是一种免疫抑制剂，对机体的体液免疫和细胞免疫都表现出一定的抑制程度^[12]。

1.2.5 白扁豆

白扁豆功能为健脾去湿、利尿消肿、养肝明目。用于治疗脾虚肺燥、食欲不振、便秘、头晕目眩、上吐下泻、胸闷腹胀。白扁豆的现代药理研究结果表明：

（1）抗菌、抗病毒作用：白扁豆能抑制痢疾杆菌的繁殖，实验表明，白扁豆水提取物可以显著消除小鼠哥伦比亚SK病毒的抑制作用。其他研究表明，白扁豆对食物中毒引发的急性胃肠炎、上吐下泻等症状有良好的缓解治疗作用。

（2）抗氧化活性：在体外测试白扁豆中多糖的抗氧化活性。结果表明，白扁豆可以清除超氧离子自由基和羟基自由基，并随浓度变化呈现出不同的效率。研究白扁豆中多糖成分如何影响正常小鼠体内抗氧化的能力，试验结果说明白扁豆可提升超氧化物歧化酶活性，抑制体内氧化进程，从而显著提升小鼠的抗氧化能力。

（3）阻碍或抑制神经细胞缺氧性凋亡：通过研究白扁豆多糖对神经细胞缺氧性凋亡的影响机制发现，其多糖可以阻断ABX的表达，增加Ebl-2的表达及其ABX比例，并阻断诱导神经元凋亡的基因表达从而达到保护神经的作用。研究胚鼠大脑皮层神经细胞在缺氧条件下坏死的机制，发现白扁豆多糖能促进胚胎大鼠神经生长因子的表达，显著抑制神经元缺氧凋亡基因的表达，从而发挥出抑制缺氧诱导的神经细胞凋亡的作用。

（4）对酒精性肝病（ALD）：通过大鼠实验，发现白扁豆可降低ALD模型大鼠的肝脏指数和血清ALST，ASLT，TG，TC水平，改善肝组织病理形态，上调SAOD和GSH的表达可以在ALD预防中发挥作用。