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摘 要

解淀粉芽孢杆菌在其新陈代谢下会形成大量的酶蛋白，以解淀粉酶最为突出，同时会形成大量的多肽类抑菌物质，可以抑制多种致病菌（真菌，细菌）的繁殖。解淀粉芽胞杆菌作为微生态制剂已广泛应用于养殖、医药等领域，并且已经形成了相当成熟完整的生产工艺，其在防治农作物真菌病害等领域应用潜力非常巨大。

本文以解淀粉芽孢杆菌JT-84为对象，以提高解淀粉芽孢杆菌活菌数和防治效果为目的，对解淀粉芽孢杆菌JT-84的发酵工艺进行优化，同时在最优的筛选条件下不同的方法制备微生态制剂，使其制剂的稳定性和菌存活率达到最大。从而节约社会成本，达到最大的经济效应。

关键词：生物农药 解淀粉芽孢杆菌 微生态制剂 发酵优化

Microecological Preparation on Bacillus amyloliquefaciens

ABSTRACT

Bacillus amyloliquefaciens will form a large number of enzyme proteins under its metabolism, and the most prominent is the amylase. It also will form a large number of polypeptide antibacterial substances, which can inhibit the proliferation of a variety of pathogenic bacteria (fungi, bacteria).Bacillus amyloliquefaciens has been widely used as a microecological preparation in aquaculture, medicine, and other fields, and it has formed a fairly mature and complete production process. Its application potential in the fields of controlling fungal diseases of crops is very great.

In this paper, for the purpose of improving the viable count and controlling effect of Bacillus amyloliquefaciens，the fermentation process of Bacillus amyloliquefaciens JT-84 was optimized. At the same time,under the optimal screening conditions microecological preparations were prepared by different methods to maximize the stability of the preparations and the survival rate of the bacteria.

KEYWORDS: Biopesticides；Bacillus amyloliquefaciens ；Microecological preparation；Fermentation optimization

目 录

第一章 文献综述 1

1.1生物农药概述 1

1.1.1生物农药的简介与分类 1

1.1.2生物农药的优势 1

1.1.3生物农药推广应用中的问题 2

1.2生物农药的应用现状及研究进展 3

1.2.1国内外研究现状与发展趋势 3

1.2.2我国微生物农药研究现状与产业发展前景 3

1.3解淀粉芽孢杆菌的生物制剂研究概况 5

1.3.1农药微生物制剂概况 5

1.3.2解淀粉芽孢杆菌简介 5

1.3.3解淀粉芽孢杆菌的应用 6

1.4本课题的主要研究内容 6

第二章 JT-84培养基的优化 8

2.1材料与方法 8

2.1.1实验菌种 8

2.1.2试剂与仪器 8

2.1.3培养基 9

2.1.4菌种活化 9

2.1.5发酵 9

2.1.6生物量的测定 9

2.1.7培养基的优化 9

2.1.8 PB实验设计 10

2.1.9最陡爬坡实验 10

2.1.10响应面分析法 10

2.1.11 发酵条件的优化 11

2.2结果与分析 11

2.2.1碳源对解淀粉芽孢杆菌JT-84发酵影响 11

2.2.2氮源对解淀粉芽孢杆菌JT-84发酵影响 11

2.2.3无机盐对解淀粉芽孢杆菌JT-84发酵影响 12

2.2.4 PB设计实验筛选对解淀粉芽孢杆菌JT-84发酵影响较显著因素 13

2.2.5解淀粉芽孢杆菌JT-84最陡爬坡实验设计 15

2.2.6响应面法优化发酵培养基 16

2.2.7培养条件对解淀粉芽孢杆菌JT-84发酵影响 19

2.3小结 22

第三章 JT-84微生态制剂稳定性研究 24

3.1引言 24

3.2材料 24

3.2.1菌种 24

3.2.2培养基 24

3.2.3试剂与设备 24

3.3方法 26

3.3.1菌种发酵 26

3.3.2解淀粉芽孢杆菌微生态制剂的制备 26

3.3.3解淀粉芽孢杆菌微生态制剂的保存方法 26

3.3.4微生态制剂活菌数的测定 27

3.4结果分析 27

3.4.1原始解淀粉芽孢杆菌菌悬液活菌数的测定 27

3.4.2乳化法制备的解淀粉芽孢杆菌制剂稳定性的研究 27

3.4.3挤压法制备的解淀粉芽孢杆菌制剂稳定性的研究 28

3.5小结 29

第四章 结论 30

参考文献 31

致 谢 33

第一章 文献综述

目前，我国拥有134万平方公里的土地，遭受农药残留的面积高达80万平方公里，其中污染严重的比率达40%^[1]，并且过量使用化学合成农药导致的环境污染，生物多样性下降，已成为社会的一大公害^[2]。随着人们环保意识的增强，人们对环境质量的要求和绿色农产品的需求也更加强烈，对农作物生产绿色化、无污染的呼声也越来越高。

1.1生物农药概述

1.1.1生物农药的简介与分类

生物农药是指用菌体或者其他生命活体做成的制剂类型，其可以对庄稼以及果蔬起到除害，提高收率的作用。

1. 微生物农药是指利用自身侵染能力或代谢物杀死农业有害生物，如苏云金芽胞杆菌、木霉菌、浏阳霉素、阿维菌素等^[3]。
2. 动物源农药主要有对农作物病害具有防治作用的活体动物和动物代谢物。比如寄生蜂通过在寄主体表或体内产卵，让幼虫取食寄主来杀灭害虫；病虫孵化器使用保幼激素能造成昆虫不正常化蛹而杀灭害虫^[4]。

（3）植物源农药是利用植物体内含有的稳定有效成分，经过工业化萃取等手段制成农药，按一定的方法对作物进行施用，减轻病、虫、杂草对作物造成危害的植物源制剂。

（4）生物化学农药是结合生物、化学手段生产的新型农药。

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