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摘 要

本试验建立了植物生物反应器扩繁栀子愈伤组织体系，并检测了不同培养周期（20d、30d、40d）和诱导子处理的栀子愈伤组织中的藏红花素含量。在培养基为MS 2.0 mg/L 6-BA 0.2 mg/L NAA 30 g/L蔗糖，pH为6.5的条件下，栀子愈伤在植物生物反应器实现了高通量扩繁。研究表明：植物生物反应器培养的栀子愈伤中的藏红花素含量高于固体培养，且培养40d的栀子愈伤的藏红花素含量高于培养20d、30d的栀子愈伤组织；在添加CuSO₄和MeJA后，愈伤组织的增殖系数变低，生长受到抑制，不利于每罐栀子愈伤组织的产量；但添加诱导子促进了栀子愈伤组织中藏红花素合成，单位质量栀子愈伤中的藏红花素含量增加，达到0.3723mg/g。

关键词：藏红花素 栀子愈伤 植物生物反应器 诱导子

Analysis of crocin content in Gardenia jasminoides callus

cultured by TIBS

Abstract

In this experiment, the plant bioreactors system was established for propagation the callus of Gardenia jasminoides , and the content of crocin in the callus of Gardenia jasminoides treated with different culture periods (20d, 30d, 40d) and inducers was detected. When the medium was MS 2.0 mg/L 6-BA 0.2 mg/L NAA 30 g/L sucrose and the pH is 6.5, the callus of the Gardenia jasminoides had high-throughput propagation in plant bioreactors. The research shows that the content of crocin in callus cultured in plant bioreactor was higher than that in solid culture, and the content of crocin in callus of 40-day culture was higher than that in callus of 20- day and 30-day culture. After addition of CuSO₄ and methyl jasmonate (MeJA), the growth modulus of callus became lower and the growth was inhibited, which was not conducive to the yield of callus per plant bioreactor. But the addition of inducers promoted the synthesis of crocin in the callus of Gardenia jasminoides and the content of crocin in callus of unit mass was increased to 0.3723 mg/g.

Key words：crocin；Gardenia jasminoides callus；plant bioreactor；inducer

目录

摘 要 I

Abstract II

第一章 文献综述 1

1.1 藏红花素概述 1

1.1.1 藏红花素药用价值 1

1.1.2 藏红花素来源 1

1.2 栀子概述 1

1.2.1栀子的应用价值 2

1.2.2 栀子的研究现状 2

1.3 植物生物反应器在组培中的应用 3

1.4 藏红花素制备 4

1.4.1藏红花素诱导方法 4

1.4.2藏红花素的提取 4

1.4.3藏红花素检测 4

1.5实验的研究目的 4

第二章 实验材料与方法 6

2.1 实验材料 6

2.1.1 材料 6

2.1.2 试剂 6

2.2 试验方法 7

2.2.1 栀子愈伤固体培养 7

2.2.2 植物生物反应器培养 7

2.2.3 不同周期对栀子愈伤的影响 7

2.2.4 不同诱导子对栀子愈伤的影响 7

2.2.5 栀子愈伤增殖系数的测定 7

2.2.6待测样品的处理 7

2.2.7 液相色谱条件的选择 8

2.2.8 液相色谱标准曲线的建立 8

2.2.9 实验数据分析 8

第三章 实验结果与分析 9

3.1 栀子愈伤的植物生物反应器培养 9

3.1.1 不同培养时间对栀子愈伤增殖的影响 9

3.1.2 添加不同诱导子对栀子愈伤增殖的影响 10

3.2 藏红花素标准曲线的建立 11

3.3 样品中藏红花素含量的检测结果 11

第四章 总结与展望 18

4.1 总结 18

4.2 展望 18

参考文献 19

致谢 22

第一章 文献综述

1.1 藏红花素概述

藏红花(Crocus sativus L.)，又名西红花，属于鸢尾科番红花类植物，可作为药物用于医学临床中，中医认为其味甘，微苦，入心，具有散郁开结、活血化瘀的作用^[1]。藏红花素(Crocin)，又名西红花苷，是藏红花的有色成分且是主要成分，其化学组成是藏红花酸形成的一种糖苷，主要由四种藏红花素（分别为藏红花素1~4）组成，其中含量最高是藏红花素-1的，占总藏红花素含量的70%以上。

1.1.1 藏红花素药用价值

藏红花素的降血脂作用：目前，老年人由于血脂高，面临着高脂血症甚至动脉硬化的病症。Lari 等^[2]研究表明，注射藏花素能显著降低大鼠血清中胆固醇含量；Asdaq 等^[3]将含有藏红花素成分的药物注射进高脂血症大鼠体内，发现大鼠的血脂代谢恢复正常，从而提出藏红花素可以预防高血脂动脉硬化，降低血脂。

藏红花素的抗肿瘤作用：除了高血脂，肿瘤也是老年人的高发病，然而对于该病，目前仍无法治愈。Wang等^[4]设计了大鼠试验，发现患病大鼠在藏红花素的作用下，体内蛋白的磷酸化表达减弱，从而达到治疗肿瘤的作用。同时，藏红花柱头中的藏红花素已表明有明确的抗肿瘤作用并且在治疗癌症的过程中产生的毒副作用很小，在治疗癌症方面具有广泛的研究前景^[5]。

藏红花的经济价值：因为藏红花只用柱头入药，产量极低；并且其资源极其有限，导致其价格十分昂贵，达到每公斤2000美元^[6]。

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