论文总字数：16119字

摘 要

绿原酸（Chlorogenic acid, CHA）是一种存在于植物体内重要的次生代谢物，拥有多种生物活性，具有抑菌消毒、活血降压、抗氧化、防衰老等作用，早已被投入运用于食品、保健品、药品以及日用品等多个行业领域。本实验将采用醇提法、生物酶解法和超声提取法这3种实验方法来提取目标产物（绿原酸），通过单因素实验和正交试验相结合的实验方法，筛选得到最优提取工艺，然后应用紫外分光光度法来测定提取产物的纯度。结果显示，超声波提取法效果相对其它两种方法较好，其最佳提取工艺参数为常温下超声时间为40 min，乙醇浓度为95%，料液比（W/V）为1:50，超声功率为320W，得率可达5.187%。

关键字：金银花 绿原酸 提取方法

Study on the Extraction Process of Chlorogenic Acid in Flos Lonicerae

Abstract

Chlorogenic acid is an important secondary metabolic product in plants. It has a variety of biological activities and it also has antibacterial disinfection, blood pressure, anti-oxidation, anti-aging and other effects. It has already been applied on food, medicine, cosmetics and other fields. This experiment used alcohol extraction, enzymatic hydrolysis and ultrasonic extraction to extract cholorogenic acid from flos lonicerae. Single factor experiment and orthogonal experiment were combined to screen optimal extraction process. Then the purity of the extract product was tested by UV spectrophotometry. The results showed that ultrasonic extraction effect was better than other two methods. Under the optimum extraction conditions: ultrasonic time 40 min, ultrasonic power 320 W, ethanol concentration 95%, the ratio of material to liquid 1:50, good yield (5.187%) was obtained .

Keywords: Flos Lonicerae; Chlorogenic Acid; Extraction

目录

摘 要 I

Abstract II

第一章 文献综述 1

1.1 绿原酸的简介 1

1.1.1 绿原酸的理化性质 1

1.1.2 绿原酸的分布 1

1.2 绿原酸的提取方法 2

1.2.1 水提法 2

1.2.2 醇提法 3

1.2.3 生物酶解法 3

1.2.4 超声提取法 3

1.3 绿原酸的分离纯化方法 4

1.3.1 大孔树脂法 4

1.3.2 超滤膜分离法 4

1.3.3 其他分离法 5

1.4 绿原酸的分析测定方法 5

1.4.1 紫外分光光度法 5

1.4.2高效液相色谱法 5

1.5 本论文研究内容 6

第二章 实验器材与方法 7

2.1 实验材料与仪器 7

2.1.1 材料 7

2.1.2 实验器材 7

2.2 实验方法 8

2.2.1 醇提法 8

2.2.2 超声提取法 8

2.2.3生物酶解法 8

第三章 结果与讨论

3.1 标准曲线的绘制 9

3.2 醇提法 10

3.2.1 单因素实验 10

3.2.2 正交试验设计 11

3.2.3 正交试验结果 11

3.3 生物酶解法 11

3.3.1 单因素实验 11

3.3.2 正交试验设计 11

3.3.3 正交试验结果 11

3.4 超声提取法 11

3.4.1 单因素实验 11

3.4.2 正交试验设计 11

3.4.3 正交试验结果 11

第四章 结论与展望 11

4.1 结论 11

4.2 展望 11

参考文献 11

致 谢 11

第一章 文献综述

1.1 绿原酸的简介

绿原酸（Chlorogenic acid, CHA），又称3-咖啡酰奎宁酸，是一种多酚类化合物，主要来源于植物体的有氧呼吸，提取于忍冬科植物忍冬的花，是金银花的主要抗菌、抗病毒有效药理成分之一^[1]。作为众多药材、花和水果蔬菜等产生效用的重要构成部分，绿原酸可以产生很多医疗作用^[2]，例如：抗氧化、排出体内毒素、保护心血管、降低体内血脂血糖浓度、增强人体抵抗能力及其他功能。目前，该类物质已经普遍运用于医药品、食品、保健品以及其他行业领域，深入人们日常生活。

1.1.1 绿原酸的理化性质

绿原酸的化学性质主要是因为它的化学式组成中有酯键、不饱和双键及多元酚三个不稳定官能团部分，分子式为C₁₆H₁₈O₉，为淡黄色的固体，熔点为208 ℃，密度为1.65g/cm³，在25 ℃水中溶解度只有4%，但随着水温逐渐升高，溶解也更充分，易溶于醇类有机溶剂如乙醇。因其结构容易改变，所以在提取的时候不可以温度过高和加热时间过长^[3-5]。

图1-1绿原酸结构式

1.1.2 绿原酸的分布

绿原酸遍及忍冬科植物中^[6-9]，在金银花、杜仲叶、菊花、木瓜、咖啡豆以及其他一些植物中均能发现绿原酸的存在，其中金银花和杜仲叶这两种植物较其他物种植物含量稍多一些。此外，一些蔬菜水果中也含有绿原酸。

表1-1 含绿原酸的植物的分布及其含量（%）^[10-12]

1.2 绿原酸的提取方法

1.2.1 水提法

通过阅读文献[13]，王茜等在实验中把水作为溶剂来提取绿原酸，实验最终呈现的较优提取条件：温度60 ℃，料液比（W/V）为1:16，pH 4.0，提取时间为3小时，提取率可达76.51%。

魏锐等通过单因素实验和响应面分析法结合的实验思路来优化水提绿原酸，得到最终提取条件：设置料液比（W/V）1:16，提取温度65 ℃，共提取两次，每次提取20分钟，最终绿原酸的得率为1.67%^[14]。

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