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摘 要

沙格列汀是一种高效二肽基肽酶-4抑制剂，通过选择性抑制DPP-4，可以升高内源性胰高血糖素样肽-1和葡萄糖依赖性促胰岛素释放多肽水平，从而调节血糖。多项沙格列汀临床研究相继发表，一致证实了其降低HbA1c、空腹血糖（FPG）、餐后血糖（PPG）水平及良好的耐受性和安全性作用。

BOC-L-焦谷氨酸乙酯作为沙格列汀中间体，对其进行有关物质检测方法开发及方法学验证具有重要意义。

根据BOC-L-焦谷氨酸乙酯结构式和物理、化学性质选择合适流动相及色谱柱，调整流动相梯度，将BOC-L-焦谷氨酸乙酯和杂质分开，确定其有关物质检测方法。

对BOC-L-焦谷氨酸乙酯有关物质检测方法进行方法学验证，主要验证内容有:专属性、检测限和定量限、线性、准确度（回收率）、精密度及耐用性。最终确定该有关物质检测方法适合对BOC-L-焦谷氨酸乙酯进行检测。

关键词:BOC-L-焦谷氨酸乙酯；专属性；检测限；定量限；线性；回收率；精密度；耐用性

Related substance determination and methodology validation of BOC-L-pyroglutamicacid ethy ester

Abstract

Saxagliptin is a highly dipeptidyl peptidase 4 inhibitor, DPP-4, can be raised endogenous glucagon-like peptide-1 and glucose-dependent insulinotropic polypeptide is assayed by selective inhibition, thereby regulating blood sugar. Number of saxagliptin clinical studies have been published, consistently demonstrated its lowered HbA1c, fasting plasma glucose (FPG), postprandial glucose (PPG) levels and good tolerability and safety role.

BOC-L- pyroglutamic acid ethyl ester intermediate as saxagliptin, its significance related substance detection method development and method validation.

Selected according to the BOC-L- pyroglutamic acid ethyl ester of structure and physical and chemical properties suitable mobile phase and column, adjust the mobile phase gradient, the BOC-L- pyroglutamic acid ethyl ester and impurities separated, determine its Related Substances method.

Methods for the determination of BOC-L- coke and glutamic acid ethyl ester related substances, Verify main contents are: specificity, limit of detection and quantification limits, linearity, accuracy (recovery), precision and durability. The final determination of related substances detection methods suitable for BOC-L- pyroglutamic acid ethyl ester were detected

Keywords: BOC-L- pyroglutamic acid ethyl；specificity；limited of detection；limit of quantitation； linearity；recovery durability；precision；ruggedness

目录

摘要 I

Abstract II

第一章 引言 1

第二章 分析方法开发 3

第三章 有关物质方法学验证 5

3.1专属性 5

3.1.1操作方法 5

3.1.2可接受标准 5

3.1.3测定结果 6

3.1.4结果评价 6

3.2检测限和定量限 7

3.2.1 操作方法 7

3.2.2可接受标准 7

3.2.3 测定结果 8

3.2.4结果评价 8

3.3线性（定量限至限度的200%） 9

3.3.1操作方法: 9

3.3.2可接受标准 9

3.3.3测试结果 10

4.1精密度 11

4.1.1 重复性 11

4.1.2中间精密度 11

5.1回收率 13

5.1.1操作方法 13

5.1.2公式 13

5.1.3可接受标准 14

5.1.4测定结果 15

6.1耐用性试验 16

6.1.1溶液稳定性 16

6.1.2 耐用性 18

致谢 20

参考文献 22

附录 23

第一章 引言

Boc-L-焦谷氨酸乙酯作为沙格列汀的中间体，对其分析方法的开发具有重要意义。

根据Boc-L-焦谷氨酸乙酯的化学结构式，酸碱度，参考其他文献[1,2]对有关物质发开发的方法，从而选择了切合实际的流动相，确定了流动相的梯度等其他分析条件[3]。同时为了证实当前采取的方法适用于相对应的检测要求，我们需要对BOC-L-焦谷氨酸乙酯质量标准分析方法进行验证[4,5]。在创设中间体质量标准时，分析方法需要通过一系列的考证[6]；方法学验证是检测方法可靠的基本保证，因为这个原因，它成为实验室标准操作规程（SOP）的重点内容。

本文根据中国药典2015年版药品质量标准分析方法验证指导原则[7]，参照我国国家食品药品监督管理局的管理规范，与平时实验室经验相结合，总结了以色谱分析方法为主的Boc-L-焦谷氨酸乙酯分析方法学验证内容及其标准制定中有待发展的方向，以供参考。确定BOC-L-焦谷氨酸乙酯验证的分析项目有以下几项。见图1.1

图1.1 验证项目

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