HPLC分析发酵液中瓜氨酸的方法研究文献综述
2020-04-07 16:23:05
文 献 综 述
1.1 瓜氨酸的概述
瓜氨酸(citrulline)是首先从西瓜汁中发现的人体内非蛋白质氨基酸,也是人体尿素循环的一个重要中间代谢物。瓜氨酸是由鸟氨酸及胺基甲酰磷酸盐在尿素循环中生成的,或是透过一氧化氮合酶(NOS)催化生成精氨酸的副产物。瓜氨酸具有很多重要的生理作用,如血管舒张作用,提高人体免疫系统功能,抗氧化,稳定血压及治疗类风湿性关节炎[1-3]。于是,对瓜氨酸的研究显得尤为重要。
1.2 瓜氨酸的制备
瓜氨酸的生产方法目前主要有:酶法,化学法,提取法,发酵法[4]。
酶法在工业生产中所用的精氨酸脱亚氨基酶活性低,影响瓜氨酸的生产[5];化学法过程控制比较困难,生产过程中产生大量废水,污染环境[6];提取法受原料来源限制,工艺较复杂,分离提纯困难,产酸率低,经济效益差一直没有得到很好的发展;发酵法是1966年Shinji Okumura等人[7]经过72h的发酵得到瓜氨酸。采用发酵法生产瓜氨酸成本低,产量高,产品纯度好,是工业生产中很好的瓜氨酸生产方式。
1.3 瓜氨酸的检测方法
瓜氨酸的检测方法主要有薄层层析法,薄层扫描法,分光光度法和高效液相色谱法[8-11]。
薄层层析法可以有效简单的定性分析发酵液中的氨基酸成分,薄层扫描法和分光光度法也都可快速,准确的检测出瓜氨酸,但分光光度法样品前处理非常复杂,并且加入基团时试剂较昂贵,一般不采用。高效液相色谱法灵敏度高,重复性好,分析迅速,结果精确等优点。在面对发酵液中的瓜氨酸的定量检测时我们选用高效液相色谱的方法较准确可靠。
1.4 瓜氨酸的衍生[12]