文 献 综 述

1.酶的固定化技术

酶是具有生物催化功能的生物大分子，酶催化具有催化效率高、专一性强、作用条件温和及环境友好等显著特点，广泛应用于食品、医药、轻工、化工和环境保护等行业。在资源、能源短缺和环境不断恶化的今天，酶促转化已被提到空前重要的战略高度[1]。但游离酶因稳定性差、难以回收、易混入产品和不易循环利用等缺点使其应用受到限制，通过物理或化学的方法将酶固定于载体后可以克服游离酶的弱点，并且固定化酶具有稳定性好、易从反应系统中分离、能重复使用、便于运输和储存、有利于生产的连续化和自动化等优点，因而具有更广阔的应用空间[2-3]。

1.1酶的固定化方法

脂肪酶固定化方法大致可分为吸附法、交联法、共价结合法和包埋法四种[4] 。

1.1.1吸附法

吸附法主要是利用离子键、疏水相互作用、范德华力和氢键等相互作用将酶固定在载体上的一种方法，根据酶和载体之间结合力的不同，该法又可分为物理吸附法和离子吸附法两种。采用吸附法制备固定化脂肪酶时通常选用介孔材料为载体然后采用有机硅烷试剂对其进行表面的改性使其带有一定的疏水性[5]。常用吸附剂有活性炭、氧化铝、硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃等。采用吸附法固定酶，其操作简便、条件温和，不会引起酶变性或失活，且载体廉价易得，可反复使用[6]。

1.1.2共价结合法

共价结合法，即酶蛋白的非必需基团通过共价键和载体形成不可逆的连接。在温和的条件下能偶联的蛋白质基团包括：氨基、羧基、半胱氨酸的巯基、组氨酸的咪唑基、酪氨酸的酚基、丝氨酸和苏氨酸的羟基。参加和载体共价结合的基团，不能是酶表现活力所必需的基团[7]。此法曾先后用于3′-核糖核酸酶、5′-磷酸二酯酶和葡萄糖淀粉酶等的固定化。

1.1.3交联法