纸质文物侵染微生物的酶学分析文献综述
2020-05-23 15:58:50
纸质文物纸张的成分是纤维素,自然状态下,纤维素稳定存在,但易被纤维素酶彻底水解为葡萄糖,因此,侵染纸质文物的微生物酶主要是纤维素酶。
1.纤维素
#160;#160;纤维素是由葡萄糖组成的大分子多糖,不溶于水及一般有机溶剂,是植物细胞壁的主要成分。常温下,纤维素既不溶于水,又不溶于一般的有机溶剂,如酒精、乙醚、丙酮、苯等。它也不溶于稀碱溶液中。因此,在常温下,它是比较稳定的,这是因为纤维素分子之间存在氢键。纤维素不溶于水和乙醇、乙醚等有机溶剂,能溶于铜氨Cu(NH3)4(OH)2溶液和铜乙二胺[NH2CH2CH2NH2]Cu(OH)2溶液等。
2.纤维素酶
#160;#160;纤维素酶是将纤维素水解成葡萄糖的一组酶的总称,它不是单种酶,主要由三个组分组成:#129;内切葡聚糖酶,即C1酶;#8218;纤维二糖水解酶,即Cx酶;#402;β-葡萄糖苷酶。他们在适当条件下协同作用,将纤维素水解为葡萄糖。
3.纤维素酶水解纤维素时酶活性的确定
#160;#160;纤维质底物的不均一性、不同微生物产生纤维素酶的复杂性、纤维素酶作用于纤维素时彼此之间的协同作用等各种因素导致目前纤维素酶水解纤维素的分子机制以及结构尚待进一步阐释,因此不同实验室有关酶活的测定差异较大。虽然1984年IUPAC生物技术委员会曾经公布过纤维素酶测定的标准方法且其中一些方法为生物技术专家广泛接受,但酶学专家则认为这些方法太过局限。直到Wood和Bhat重新分析了实验室里用来测定真菌纤维素酶的方法,并指出了各种方法的利弊。虽然其中大部分方法是针对木酶纤维素酶的,但同时也可用于其他微生物产生的纤维素酶。
#160;#160;该方法强调用不同底物来测定不同纤维素酶组分,具体方法为:用微晶纤维素和无定形纤维素来测定外切-1,4-β-葡聚糖酶(C1酶)的酶活;用羧甲基纤维素(CMC)和无定形纤维素测定内切-1,4-β-葡聚糖酶(Cx酶)的酶活;用纤维二糖,水杨苷(salicia)测定β-葡萄糖苷酶(CB酶)的酶活;用滤纸和棉花测定总酶活(C1 Cx CB)
#160;#160;由以上可知,用羧甲基纤维素钠和滤纸作底物时,可测出内切-1,4-β-葡聚糖的酶活(CMC酶活)和纤维素总酶活(FPA酶活)的大小;CMC酶活大小为定值时,FPA酶活大小即可反映出另外两种酶活性的大小
4.酶活测定方法