全文总字数：2431字

1. 毕业设计（论文）的内容、要求、设计方案、规划等

一、前言及要求clustered regularly interspaced short palindromic repeats (crispr)/crispr-associated (cas)9 系统成功被改造为第三代人工核酸内切酶，与锌指核酸内切酶(zinc finger endonuclease，zfn)和类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease，talen)一样可用于各种复杂基因组的编辑。

目前该技术成功应用于人类细胞、斑马鱼和小鼠以及细菌的基因组精确修饰，修饰类型包括基因定点indel 突变、基因定点敲入、两位点同时突变和小片段的缺失。

由于其突变效率高、制作简单及成本低的特点，被认为是一种具有广阔应用前景的基因组定点改造分子工具。

2. 参考文献（不低于12篇）

要求阅读的文献:1. 包勇, 姜小筱, 杨永华. RNA 编辑技术 CRISPR/Cas9 的原理及功能[J]. 药学研究, 2016 (1): 1-9.2. Bortesi L, Fischer R. The CRISPR/Cas9 system for plant genome editing and beyond [J]. Biotechnology advances, 2015, 33(1): 41-52. 3. Fan D, Liu T, Li C, et al. Efficient CRISPR/Cas9-mediated targeted mutagenesis in Populus in the first generation [J]. Scientific reports, 2015, 5.4. 方锐, 畅飞, 孙照霖, 等. CRISPR/Cas9 介导的基因组定点编辑技术[J]. 生物化学与生物物理进展, 2013, 40(8): 691-702.5. 景润春, 卢洪. CRISPR/Cas9 基因组定向编辑技术的发展与在作物遗传育种中的应用[J]. 中国农业科学, 2016, 49(7): 1219-1229.6. 解莉楠, 宋凤艳, 张旸. CRISPR/Cas9 系统在植物基因组定点编辑中的研究进展[J]. 中国农业科学, 2015, 48(9): 1669-1677.7. 李君, 张毅, 陈坤玲, 等. CRISPR/Cas 系统: RNA 靶向的基因组定向编辑新技术[J]. 遗传, 2013, 35(11): 1265-1273.8. 刘婷婷, 范迪, 冉玲玉, 等. 应用 CRISPR/Cas9 技术在杨树中高效敲除多个靶基因[J]. 遗传, 2015, 37(10): 1044-1052.9. 平文丽, 李雪君, 林娟, 等. CRISPR/Cas9 介导的基因组编辑技术及其在作物品种改良中的应用[J]. 中国农学通报, 2016, 32(5): 16-22.10. 谢胜松, 张懿, 张利生, 等. CRISPR/Cas9 系统中 sgRNA 设计与脱靶效应评估[J]. 遗传, 2015, 37(11): 1125-1136.11. Xing H L, Dong L, Wang Z P, et al. A CRISPR/Cas9 toolkit for multiplex genome editing in plants [J]. BMC plant biology, 2014, 14(1): 1.12. 曾秀英, 侯学文. CRISPR/Cas9 基因组编辑技术在植物基因功能研究及植物改良中的应用[J]. 植物生理学报, 2015, 51(9): 1351-1358.13. 郑小梅, 张晓立, 于建东, 等. CRISPR-Cas9 介导的基因组编辑技术的研究进展[J]. 生物技术进展, 2015, 1: 1-9.