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1. 1. 毕业设计（论文）的内容、要求、设计方案、规划等

1、前言

希金斯炭疽菌引起的植物炭疽病是一种世界性的真菌病害，主要分布于中国、日本、印度、美国以及东南亚地区，主要侵染十字花科植物，造成严重的经济损失。希金斯炭疽病菌是目前少数被全基因组测序的几个植物病原真菌之一，由于模式植物---拟南芥是其的一个侵染寄主，因此利用拟南芥-希金斯炭疽病菌的互作平台开展丝状真菌的致病性分子机制也成为近年来分子植物病理学研究的热点之一。

胞内磷酸激酶是真核生物中广泛存在且进化上高度保守的一种蛋白。胞内蛋白激酶催化下游蛋白质的磷酸化实现胞内信号的传导。在模式真菌酵母菌中，scsat4作为胞内磷酸激酶，通过磷酸化trk1蛋白，促进细胞对na、k离子的吸收，以此来调节细胞内的质子平衡和电荷平衡，维持胞内环境的稳态。目前，在希金斯炭疽病菌也发现了scsat4的同源蛋白chsat4，但目前关于该基因的功能尚不清楚。本研究拟对希金斯炭疽病菌的chsat4进行基因敲除，并通过与野生型菌株的对比分析，揭示chsat4的生物学功能，基本阐明该蛋白在希金斯炭疽病菌的营养生长、产孢、胁迫抗性和致病过程中的生物学功能。

2.本研究的主要内容包括：（1）chsat4基因的敲除载体构建。（2）chsat4基因的敲除载体的转化与突变体获得。（3）chsat4基因突变体的生物学功能分析。

2. 参考文献（不低于12篇）

[1] kim yk, kawano t, li d, et al. a mitogen-activated protein kinase kinase required for induction of cytokinesis and appressorium formation by hostsignals in the conidia of colletotrichum gloeosporioides[j]. plant cell, 2000, 12:1331-1343.

[2] kosti i, mandel-gutfreund y, glaser f, et al. comparative analysis of fungal protein kinases and associated domains [j]. bmc genomics,2010, 11: 133.

[3] mulet j m, leube m p, kron s j, et al. a novel mechanism of ion homeostasis and salt tolerance in yeast: the hal4 and hal5 protein kinases modulate the trk1-trk2 potassium transporter [j]. molecular cell biology, 1999,19: 33283337.