杉木光敏色素A基因(phyA)的克隆及遗传转化分析任务书
2022-01-19 21:26:45
全文总字数:2277字
1. 毕业设计(论文)的内容、要求、设计方案、规划等
1. 前言:通过查阅指定的中文和外文文献,了解光在植物生长发育过程中的重要调控影响以及植物对不同光质信号(包括紫外光、蓝光、红光和远红光)的识别和应答机制;在此基础上,重点地了解光敏色素家族的构成、结构基础以及光敏色素a和b(phya和phyb)参与植物光形态建成(包括分枝发育)调节的分子发生途径等;2. 研究内容:1) 不同杉木类型(洋口020杉和独杆杉)中phya基因的克隆及遗传结构比较;2) 比较和分析phya基因在洋口020杉和独杆杉腋芽发育过程中的表达变化;3) 初步地分析phya基因过量表达对烟草光形态建成过程的影响。
3. 方案拟定:2016/12-2017/2:查阅相关文献,完成文献综述及开题报告的撰写和修改;2017/3-2017/4:完成不同杉木类型中phya基因全长cdna序列的扩增、测序及比较等工作,并在此基础上,完成phya基因过量表达载体的构建及阳性克隆的检测、筛选等工作;2017/4-2017/5:完成phya过量表达载体对野生烟草的遗传转化、t1代阳性转基因苗的筛选及其表型变化的调查和统计分析等工作;撰写毕业论文,准备毕业答辩。
4. 实验数据采集和处理:1) 要求获取清晰、完整的杉木茎段rna样品、phya基因5和3端cdna序列扩增、阳性克隆检测等图片、以全长cdna序列为基础的序列比较结果以及t1代阳性转基因植株表型变化图片等;2) 调查t1代阳性转基因烟草在高、径生长以及开花、分枝和叶片等方面的表型变化,并对调查结果进行定性或定量分析。
2. 参考文献(不低于12篇)
1. 闫海芳, 周波, 李玉花. 光受体及光信号传导[J]. 植物学通报,2004,21(2):235-236.2. 马建华,郑海雷,赵中秋,张春光. 植物的光敏色素[J]. 生物学杂志,2002,19(3):1-4.3. 杨玉珍,袁秀云. 光敏色素分子及其信号转导途径[J]. 生物技术通讯,2005,16(5):586-588.4. 童哲,赵玉锦,王台等. 植物的光受体和光控发育研究[J]. 植物学报,2000,42(2):111-115.5. 李亚栋,张芊,孙学辉等. 植物分枝发育的遗传调控[J]. 中国农业科技导报,2009,11(4):1-9.6. 叶珍. 隐花色素与植物的光形态建成[J]. 四川农业大学学报,2003,21(3):267-274.7. 顾建伟,刘婧,薛彦久等. 光敏色素在水稻生长发育种的作用[J]. 中国水稻科学,2011,25(2):130-135.8. 王海,周玉萍,王小兰等. 破坏光敏色素A改变生长素反应因子8的表达谱[J]. 植物学报,2009,44(4):434-441.9. 吴峰华,常银子,杨虎清. 转反义PHYA基因对番茄红素合成的影响. 园艺学报,2009,36(5):679-684.10. 杨玲玲. RACE法克隆紫花苜蓿光敏色素A基因[M]. 河南农业大学,2008.11. 李霞. 杉木分枝发育关键基因的克隆与功能鉴定[D]. 南京林业大学,2010.12. Domagalska MA, Leyser O. Signal integration in the control of shoot branching[J]. Nat Rev Mol Cell Biol, 2011, 12:211-221.13. Franklin KA. Shade avoidance[J]. New Phytol, 2008, 179:930-944.14. Finlayson SA, Krishnareddy SR, Kebrom TH, Casal JJ. Phytochrome regulation of branching in Arabidopsis[J]. Plant Physiol, 2010, 152:1914-1927.15. Canton FR, Quail PH. Both phyA and phyB mediate light-imposed repression of PHYA gene expression in Arabidopsis[J]. Plant Physiol, 1999, 121:1207-1216.16. Hoecker U, Quail PH. The phytochrome A-specific signaling intermediate SPA1 interacts directly with COP1, a constitutive repressor of light signaling in Arabidopsis[J]. J Biol Chem, 2001, 276:38173-38178.