基于RIF糖酵解研究黄葵胶囊的抗肾间质纤维化作用开题报告
2023-01-12 09:07:34
1. 研究目的与意义
内容:黄葵胶囊是一种中药单方制剂, 主要成分为黄蜀葵花, 具有良好的清热解毒、消炎利湿功效。
通过查阅文献及相关实验发现黄葵胶囊具有良好的抑制肾脏免疫反应、炎症反应功效, 还可保护肾小管上皮细胞、预防肾脏纤维化等作用。
并且可以通过肾间质纤维化相关细胞因子介导的信号网络来调控肾间质成纤维细胞的糖代谢重编程及其活化。
2. 文献综述
黄蜀葵花的药理作用研究进展(南京中医药大学翰林学院 225300)陈桐庆摘要: 黄蜀葵花为锦葵科植物黄蜀葵的干燥花冠,民间应用历史悠久。
现代药理学证实,黄酮类化合物为主要的活性物质。
现对黄蜀葵花的药理作用的研究现状进行了综述,为黄蜀葵花的进一步研究和发展提供参考。
3. 设计方案和技术路线
研究方案:体内实验:制备小鼠UUO(单侧输尿管梗阻)模型,给药黄葵胶囊。
通过组织病理学观察(HE染色、Masson染色、Sirius Red染色)以及小鼠血清中BUN、SCR含量测定,推测黄葵胶囊可明显改善 UUO 模型小鼠肾间质纤维化,修复肾功能损伤,这种作用可能与黄葵胶囊降低 BUN 和 SCR 水平有关 ;通过检测血清中GLU、LD含量以及糖酵解关键酶的活性,推测黄葵胶囊改善小鼠肾间质纤维化可能与抑制糖酵解反应物 GLU、终产物 LD 含量和糖酵解过程中的关键酶活力有关;体外实验:采用大鼠的NRK-49F细胞复苏培养,通过MTT比色法测定黄葵胶囊对肾间质成纤维细胞增殖的抑制作用;经过MTT实验后选择适宜的浓度进行蛋白质免疫印迹法(Western BlotWB)实验,检测PKM2、HK2、GLUT1的蛋白表达含量;q-PCR实验检测PKM2、HK2、GLUT1的mRNA的表达含量;取药物干预前后的细胞上清液,检测LD、GLU的含量。
4. 工作计划
研究进度:2022.012022.02:广泛查阅并收集中外相关资料,初拟论文研究方向;2022.022022.03:在老师的指导下,拟定论文题目和写作纲要; 2022.032022.04:完成实验部分,撰写论文初稿,并交指导老师评审;2022.042022.06:反复修改论文,形成并提交定稿,准备答辩;
5. 难点与创新点
黄蜀葵花是一种常见的药食同源的传统中药,具有广泛的药理作用,但其中抗肾纤维化作用机制并不明确,肾纤维化主要通过调控不同的信号通路使rif活化。
有相关研究表明,调控糖酵解可以影响肾间质纤维化的形成。
因此,本文大胆猜想黄葵胶囊在抗纤维化方面是否是通过糖酵解途径来实现的,并通过实验来验证猜想。