1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

大豆花叶病毒病（soybean mosaic virus，smv）在我国东北、黄淮及南方大豆产区普遍发生，对大豆造成的产量损失一般10%左右，smv流行年份可造成大豆产量损失35%～50%^[1]，个别年份甚至绝产。smv还会造成大豆籽粒褐斑，从而影响大豆商品品质^[2]。

目前尚无有效的化学药剂可以防治smv，培育推广抗病品种是最经济、有效的防治手段，获得优异抗源是抗病育种的基础。

传统的育种技术仍在目前的大豆抗病育种中处于主导地位，多数大豆产区同时流行多个smv株系，这种传统方法很难在短时间内培育出对smv具有广谱抗性的品种。且大豆花叶病毒的发病情况跟流行年份有很大的关系，田间侵染率的大小决定病害流行的速率和病害最终流行的程度^[3]，因此同一地区的大豆花叶病毒株系可能随着综合因素的改变而发生变化^[4]，从而使长时间育种的效率更低。转基因技术可以打破物种间的屏障，在较短时期内将广谱抗病基因转移到大豆品种中，缩短抗病品种的选育进程。已有大量的抗smv转基因材料的获得：利用基因干扰原理，gao等^[5-6]利用smv-hc-pro基因的保守片段，构建smv基因的干扰载体pb7gwiwg2 ( ii ) hc-proi，选用天隆1号等5个大豆品种为受体材料，利用农杆菌介导大豆子叶节的遗传转化体系，获得阳性转基因大豆植株105株，目前己在高代转基因材料中获得高抗smv转基因大豆家系57个。高乐等^[7]利用smv-cp基因的保守片段，构建rnai载体pb7gwiwg2 ( ii ) -cpi，转化大豆品种华春6号，获得68棵阳性植株。高乐等^[8]利用smv与大豆互作的大豆基因eif4e构建干扰载体pb7gwiwg2 ( ii )-elf4ei，采用农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化系统，转化大豆品种天隆1号，获得45株阳性植株，从后代中得到高抗家系的平均发病等级为1.02，而对照的发病等级为3.00。对上述材料的后代进行抗性研究可以为大豆抗病育种和鉴定提供依据。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：

通过对大豆后代植株进行大豆花叶病毒病抗性鉴定并进行抗性评价和分析，对转基因大豆后代的抗大豆花叶病毒的持久性进行检验，验证前人研究结果，证实利用rnai技术改良大豆对大豆花叶病毒的抗性。

内容和解决的关键问题：

3. 研究的方法与方案

研究方案：

在防虫网室对转基因后代家系的120份大豆材料进行smv的抗病性鉴定，并设立感病对照。观察它们的发病情况，调查发病症状、发病率、病级，计算病情指数，确定品种抗性级别，通过除草剂涂抹初筛转基因植株，并且结合pcr检测和试纸条检测。结合抗病程度进行分析评价。

技术路线：

4. 研究创新点

通过SMV抗病鉴定和发病等级的调查，研究转基因大豆植株后代的抗性。证实利用RNAi技术可改良大豆对大豆花叶病毒的抗性。

5. 研究计划与进展

2016-07至2016-11月确定论文题目，鉴定研究材料smv抗性。

2016-11至2016-12月查阅中英文相关文献，完成详细的文献阅读笔记。

2016-12至2016-2月撰写开题报告、中期报告，进行数据整理分析。