1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

一、研究意义目前，土壤重金属污染的治理一直是个难题。

在自然条件下，土壤中重金属的净化需要几千年乃至更长的时间，而物理与化学方法也不能从根本上解决问题。

植物修复是解决该问题的新兴技术，具有高效率、低能耗的特点，且不破坏土壤原有的生态环境。

2. 研究的基本内容和问题

一、研究目标（1）对拟南芥中atmtp6表达产物进行定位；（2）探究atmtp6是否能结合某类重金属离子；（3）探究atmtp6是否受某类重金属离子的诱导。

二、研究内容（1）atmtp6基因片段的克隆及相应载体的构建；根据拟南芥基因组信息设计相应引物，以cdna为模板进行pcr扩增，得到atmtp6的基因片段。

将pcr扩增产物分别与pxzp008载体、pfl61载体相连，并对连接产物进行测序，用于下一步的实验。

3. 研究的方法与方案

一、研究方法（1）原生质体的瞬时表达拟南芥瞬时表达系统由哈佛大学的jen sheen教授建立，在蛋白质定位、启动子研究以及蛋白质之间相互作用方面都是很有效的研究工具。

实验通过将含有atmtp6基因片段的pxzp800表达载体导入拟南芥原生质体，在导入细胞24～96h内外源基因将维持短暂的高水平表达，表达水平与位置无关，不会受到周围染色体元件的影响。

表达的atmtp6蛋白可通过激光共聚焦显微镜观察到，由此可确定atmtp6蛋白的位置。

4. 研究创新点

从结构上看，大部分cdf蛋白家族成员含有六个跨膜区。

拟南芥中，atmtp1 - 4符合这一特点。

而atmtp6与atmtp1 - 4的亲缘关系较远，具有5个跨膜区，故在功能上存在许多特殊性。

5. 研究计划与进展

2017.09 - 2018.02完成AtMTP6基因的克隆取及相应载体的构建2018.02 - 2018.03完成AtMTP6基因表达产物的定位2018.04 - 2018.05探究AtMTP6是否能结合其他重金属离子2018.04 - 2018.05探究AtMTP6是否受该重金属离子的诱导