ELISA与IHA测猪支原体肺炎的方法比较开题报告
2022-02-07 17:21:45
1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.1本课题的意义猪支原体肺炎(mycoplasmal pneumonia of swine, mps)是一种由猪肺炎支原体(mycoplasma hyopneumoniae, mhp)引起的猪慢性呼吸道传染病。
临床上以咳嗽和气喘为主要症状,以融合性支气管肺炎为主要病变特征。
本病广泛存在于世界各地,发病率一般在50%~80%,在国内部分省市猪场,阳性率在30%~50%[1]。
2. 研究的基本内容和问题
2.1研究目标2.1.1 对用IDEXX间接ELISA和IHA方法检测的临床样品结果进行统计和系统的比较分析2.1.2 筛选出合理的适合临床检测大量样本检测、监控猪场MPS整体感染水平的方法,为我国MPS隔离净化方案提供参考2.2研究内容2.2.1 用IDEXX间接ELISA对不同临床背景猪场感染MPS的情况进行检测2.2.2 制备出致敏红细胞,用IHA法对不同临床背景猪场感染MPS的情况进行检测2.2.3 用统计学软件对IDEXX间接ELISA和IHA方法检测结果进行系统的比较分析,筛选出合理科学的检测方案2.3拟解决的关键问题2.3.1 制备出适合符合中国兽药质量监察所规定的IHA检测用致敏红细胞2.3.2 对IDEXX间接ELISA和IHA方法检测的临床样本结果进行统计学处理和系统的比较分析
3. 研究的方法与方案
3.1研究方法3.1.1 用idexx间接elisa和iha法检测临床样本3.1.2 用统计学软件对检测结果进行统计处理,对结果进行解释分析3.2实验方案3.2.1 样本的选择与采集选取10个临床背景明确,不同日龄和免疫状态的猪场作为目标猪群,拟采集262份临床血清样本,妥善处理保存3.2.2 致敏红细胞的制备3.2.2.1 绵羊血的采集采集绵羊血,血液与阿氏液按1:2比例混合,边采血便轻轻摇晃。
采集完毕后于4-8℃冰箱静置2天。
3.2.2.2 10%醛化红细胞的制备将静置后的绵羊红细胞用双层无菌纱布过滤,并量取红细胞体积。
4. 研究创新点
4.特色或创新之处4.1 IHA的使用效果国内外研究差异大,虽然在我们广泛用于临床检测,但近年来缺乏相关使用效果报道4.2 关于IDEXX间接ELISA与IHA检测临床样品的效果,目前国内尚未有系统的比较研究4.3 本项目对我国隔离净化MPS方案的制定会起到一定参考作用
5. 研究计划与进展
5.研究计划及项目进展2015.09-2015.10查找资料,选择不同临床背景的猪场采集血清样品2015-10-2016.01IDEXX间接ELISA对血清样本进行检测,制备出符合使用条件的致敏红细胞,用IHA检测血清样本2016.01-2016.05统计学处理检测结果,分析数据,撰写论文