三维DNA-AuNPs网络扩增结合热比对扩增实现超灵敏纸基miRNA检测开题报告
2022-12-30 09:56:18
1. 研究目的与意义
随着时代的发展和人民生活水平的提高,肿瘤作为当今社会不可忽视的一种疾病,极大的威胁着人类的健康。而在我国,肿瘤患者的人数也不在少数。诚然,肿瘤疾病的治疗技术在该时代背景下相当重要。但与此同时,及早的发现、检测出肿瘤细胞,从而进行及时的治疗,也是极具意义的。因此,开发出一种灵敏、准确、成熟的检测手段是十分必要的。
microrna (mirna) 是一类由内源基因编码的、长度约为20-24个核苷酸的非编码单链rna分子,它们在动植物中参与转录后基因表达调控。大多数mirna 基因以单拷贝、多拷贝或基因簇的形式存在于基因组中。大量研究表明,mirna参与许多重要的致癌基因和抑癌基因的表达与调控,所以对于mirna的检测目前已成为肿瘤检测的重要方法。
免疫胶体金技术作为一种经典的免疫学方法,在医学和生物学领域得到了广泛的应用。金免疫层析测定技术以微孔膜作为固相载体。固相膜的特点在于其多孔性,液体可以通过毛细管作用在膜上向前移行,由可目测的胶体金标记物得到直观的显色结果,从而实现目标物的快速检测。
2. 文献综述
肿瘤标志物检测方法研究进展
【摘要】肿瘤作为当今社会不可忽视的一种疾病,极大的威胁着人类的健康。诚然,肿瘤疾病的治疗技术在该时代背景下相当重要。但与此同时,及早的发现、检测出肿瘤细胞,从而进行及时的治疗,也是极具意义的。目前许多灵敏、准确、成熟的检测手段得到了开发,对临床上观察肿瘤性疾病的发生与发展以及肿瘤性疾病的筛查做出了极大的贡献。本文对近年来国内外有关肿瘤标志物不同的检测方法,从其来源、发展以及最新成果作一综述。
【关键词】肿瘤标志物;免疫分析;金纳米粒子;mirna;甲胎蛋白
3. 设计方案和技术路线
1.文献阅读 经过相关的文献阅读后,设计完整的实验方案。
2.胶体金的制备 用氯金酸和柠檬酸三钠反应制得胶体金,浓缩。
3.亲和素包裹aunps 将亲和素加入胶体金溶液中,形成包裹状的aunps。
4. 工作计划
在阅读了一定量的文献后,已设计出一套完整的实验方案。
目前,胶体金已成功制备,并且通过采取不同的方法浓缩后,确定了对后续实验条件最有利的浓缩方法。
并且正在进行亲和素的包裹,后续实验流程也处于准备阶段。
5. 难点与创新点
迄今为止,在肿瘤标志物的快速检测中,对miRNA-21的研究较少,并且检测方法较为复杂,无法进行即时检验(POCT)。
此外,本方法通过金纳米聚集后光转热能力的增强,从而大大提高了检测的灵敏度。