1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

胃肠道不但是执行消化吸收功能的器官，也是感应味觉的器官，作为机体的化学感应接口，胃肠道能够传递胃肠道的环境信息至大脑以及其他部位^[1]。胃肠道在作为消化器官执行消化吸收功能外，同时也作为内分泌器官执行着重要的内分泌功能。胃肠道内分泌细胞有a、b、d、h、g、i、k、l、n、p、s、ec细胞^[2]，在受到营养物质的刺激后，能够分泌出多种与代谢有关的激素，其中常见的有d细胞分泌的生长抑素（ss）、l细胞分泌的胰高血糖素样肽（glps）、i细胞分泌的cck、g细胞分泌的胃泌素等。

胃肠激素是一类由存在于胃肠道黏膜层及胰腺内的内分泌细胞和旁分泌细胞分泌、由胃肠壁的神经末梢所释放的一组小分子高效能生物活性物质，在胃肠道不同部位激素的分泌也有所差异，这些激素几乎都是肽类，故又称之为胃肠肽^[3]。自1902年bayliss 和 startling发现了第一个人类胃肠激素促胰液素（pz）后，人们就开始研究胃肠激素，但自20世纪60年代以来，胃肠激素研究才迅速发展。胃肠激素研究经历了下面四个时期:消化生理时期(1902～ )、化学时期(1960～ )、免疫时期(1970 ～ )和基因研究时期(1980 ～ ）。其研究手段也与生物化学、免疫学、细胞分子生物学等有紧密联系，它不仅涉及到生理、生化、细胞生物学、分子生物学、神经学科、免疫学等许多学科 , 而且在临床上也日益显示出其重要性^[4]。在现代生化技术飞速发展且充分利用的条件下，人们已知胃肠道除了分泌经典的胃肠激素外，还分泌着各种以调节肽方式发挥效用的神经肽及生长因子，现在的胃肠激素研究渗透到各个方面，如从细胞分子水平研究胃肠激素的基因结构、生物合成；受体与受体后信息传递系统；胃肠激素与胃肠生理；胃肠激素与生长调节等。目前，胃肠激素研究的规范已进入一个新的时期，从最初的根据功能寻找物质，转变为根据物质寻找功能^[5]。

胃泌素是人类最早发现的激素之一，1905年被伦敦大学edlkins首次发现并命名，以后被证实其为多肽，是胃泌素族的主要成员^[6]。胃泌素主要由胃窦及小肠上部粘膜g细胞释放。胃泌素的主要功能有刺激胃酸分泌，刺激其他物质分泌，营养作用等。

2. 研究的基本内容和问题

1、研究目标：通过采集猪离体胃窦及胃底组织，经过不同浓度的色氨酸条件下的灌流实验来测定胃底h -k -atp酶的活性、胃窦胃泌素和生长抑素的分泌量以及casr表达量，来研究色氨酸对猪胃肠道casr基因表达、胃肠激素分泌及胃功能性酶活性的影响。

2、研究内容：（1）不同浓度的色氨酸对casr表达和h -k -atp酶活性的影响 （2）由色氨酸浓度变化引起的casr表达的改变对胃泌素和生长抑素分泌的影响。

拟解决的问题：阐明不同浓度下的色氨酸对casr的影响规律和引起胃窦组织分泌胃肠激素（胃泌素和生长抑素）以及胃底h -k -atp酶的活性之间的内在联系。

3. 研究的方法与方案

1、样品采集与处理

试验猪处死后立即取出整个消化道，取出胃组织，在冰上剪取胃窦及胃底组织，在磷酸缓冲液（pbs）中漂去内容物后放入液氮中保存，用于h -k -atp酶的活性分析和后续实验。

2、灌流实验

4. 研究创新点

1、进一步研究胃肠激素与氮素感应体的作用机制。

2、通过本实验的研究，为以后研究氮在动物机体内的转化机制和提高动物饲料中氮素的利用率提供参考依据。

5. 研究计划与进展

1、研究计划：

2016.10 查阅相关文献资料，制定相关实验方案

2016.11-2017.03 正式开展实验，采样、灌流实验、测定胃泌素和生长抑素的分泌量以及h -k -atp酶的活性、rt-pcr